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DH5 aλpir感受态细胞*
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生产厂家上海徕仪生物科技有限公司是一家专注于生物技术领域的企业,由数位生物领域资深专家创办。公司现有员工60余人,其中博士以上学历占比24.2%,硕士及以上学历占比53.1%。主营业务包括分子生物学、细胞生物学、化学试剂及实验仪器设备和相关耗材,并提供从基因设计、构建到检测的一站式技术服务。
公司凭借较强的技术力量和科学的管理,为各类服务的顺利开展提供有力支撑,目前已经建立起多个实验平台,包括细胞培养、克隆构建、病毒包装、组织分析、分子检测等,实验流程均严格按照SOP操作。
公司秉承「专业、进取、诚信、务实」的经营理念,严把产品质量关,服务跟踪,以客户的需求为主要目标,竭诚为高校、科研院所的科技工作者提供各类优质产品和服务,帮助客户及单位提高研发效率、提升科研水平和增强市场竞争力。
DH5 aλpir感受态细胞*
产品货名:DH5αλpir Chemically Competent Cell
产品货号:G6018-10(10支100ul)、G6018-100(100支100ul)
规格/简介:G6018-10(10支100ul)、G6018-100(100支100ul)
基因型
F- φ80 lac Z△M15△(lacZYA- -arg F) LAMpir U169 endA1
recAl hsdR17(rk- , mk+) supE44 λ- thi -1 gyrA96 relAl phoA
简要说明|
CLBio DH5a入pir 菌株来源于DH5a,在DH5a大肠杆菌基因组中引入LAMpir,即为DH5a入pir,该菌株可以表达PIR蛋白,使得含有R6Kg ori 复制子的质粒可以在其中正常复制。DH5a入pir 菌株缺失核酸内切酶(endA),提高了质粒DNA的产量和质量;重组酶缺陷型(recA)减少插入片段的同源重组概率,保证了插入DNA的稳定性; lacZOM15 的存在使DH5a可用于蓝、白斑筛选;但DH5a入pir 菌株生长速度较慢,在平板培养或液体摇菌时应延长生长时间。CLBio DH5a λpir感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率>1X109 cfu/ μg DNA。
操作说明:
1. DH5a λpir 感受态细胞从-80°C拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物)并用手打EP管底混匀,冰中静置25分钟。
2.42*C水浴热激45秒,迅速放回冰.上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700 μ1不含抗生素的无菌LB培养基,混匀后37°C,200 rpm复苏70分钟。
4. 5000 rpm离心1分钟收集菌体,留取100 μl左右上清轻轻吹打重恳菌块并涂布到含相应抗生素的LB培养基上。
5.将平板倒置放于37°C培养箱至少18小时。
注意事项:
1.感受态细胞建议在冰中缓慢融化。插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2.DH5aλpir菌株生长缓慢,在平板上培养或液体摇菌时应延长菌体生长时间(37°C, 18 小时以上)。
3.转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少终用于涂板的菌量。
DH5 aλpir感受态细胞*