典型样品:动植物组织、植物叶片、矿石、土壤、玻璃、陶瓷、橡胶、塑料制品、固体废弃物、电子废弃物、纸张、纺织品、化学品、药片、中药材、食品等。
振动球磨仪采用上下垂直高速振荡模式,可快速促进细胞快速破碎、细胞裂解、组织均匀,使样品研磨更加均匀;对样品研磨的重复性更好,样品间无交叉污染,节省时间和人工成本,是一种效率很高的样品预处理设备。其还具有冷冻组件,可满足用户研磨和保存温度敏感样品的需求。
一、工作原理
振动球磨仪是通过振动的方式来实现对样品的粉碎研磨。其工作区域安装有两个可高频次振动(每分钟可达1500次)的摇臂,摇臂形似机械手,可放置球磨罐或研磨适配器。
设备工作时,两只摇臂作"∞"形运动,即水平摆动,其带动球磨罐内部的研磨球,赋予其动能,研磨球在容器内进行高频次、无规则的运动,实现对样品的撞击和挤压,完成粉碎和研磨。
二、振动球磨仪详细的操作步骤如下:
1、在离心管中加入样品、研磨球、裂解液(可省),盖上盖;
2、将装好样品的离心管放入适配器中;
3、将适配器及装有样品的离心管浸入液氮中进行预冷冻;
4、将适配器装到主机上,锁紧固定装置;
5、观赏防护罩,按需求设定好参数后,开始研磨;
6、等仪器*停止振动后关机,打开安全门,取出样品;
7、仪器归位。
三、工艺技术:
1、平整度:
工件的平整度取决于磨盘的平整度。随着加工领域的不断深化及精度和效率要求越来越高:“WEIANDA”从铸铁盘、合成盘、铜盘、纯锡盘、树脂盘发展到金刚石盘,并通过各种方法把盘的平面订修到佳达2um。
2、粗糙度:
表面粗糙度取决于磨料颗粒的大小、形状和磨盘的材料, 以及工件材质及硬度。
3、粗磨:
利用较粗颗粒度的磨料在磨盘与工件面上磨削,进刀量大、效率高;但磨削面较粗,适用于磨削余量较多之工作。
4、中磨:
利用中度颗粒的磨料在磨盘与工件面上磨削,进刀量快、效率高,表面粗糙度适中,适合磨削量一般之工件。
5、精磨:
利用较细颗粒度的磨料在磨盘中与工件面上磨削,进刀量较小、表面光洁度好,磨削痕均匀而细。
6、软抛光:
利用磨盘上加装一个特殊材料抛光垫或抛光布,抛光料在抛光垫或抛光布之间运动,使工件比硬抛光更有超镜子一样的高光洁度。
7、硬抛光:
利用合成盘、铜盘、锡盘、树脂盘等非常高精密度的基面加入微米级金刚石磨料,使工件表面变得既高精密平面度,又有像镜子一样的高光洁度。
四、组织研磨仪的使用方法:
1、将仪器放置在干燥通风的环境中,插上电源,观察仪器控制显示器是否正常亮灯。打开仪器,测试控制按钮是否能正常使用,仪器空载运行时是否有异响。
2、将适量样品和研磨球放入球磨罐中,预留一定的研磨空间。初次研磨建议保持样品和研磨球各占球磨罐容积的三分之一。
3、若需要预冷冻,可将装有样品的球磨罐放入液氮环境中冷却3分钟以上,然后再装入仪器进行研磨。使用液氮进行预冷冻时,应做好防护措施,防止被冻.伤。
4、将球磨罐放入振动球球磨仪的夹具内,慢慢转动转轮,依靠自动定位的紧固装置固定好球磨罐,盖上盖子。
5、在控制显示器上设定好研磨仪的运行时间和摆动频次,开始研磨。研磨完成后,转动转轮取下球磨罐。
振动球磨仪可对硬性、中硬性和脆性样品进行细粉碎和精细研磨,还适用于软性、弹性、纤维质材料的研磨前处理。既可干磨,也可湿磨,还可进行冷冻低温研磨,在农业、生物医药、食品、地质化工、环境、质检、高校科研等多个行业的实验室都有广泛应用。
五、 实验试剂:
1.CTAB抽提液:
2%(w/v)CTAB
100 mmol/L Tris-HCl(pH8.0)
20 mmol/L EDTA(pH8.0)
1.4 mol/L NaCl
抽提含多酚较多的植物材料时(比如木本植物),上述抽提液中可另加入2%的PVP(聚乙烯吡咯烷酮)。
抽提液于室温保存,可在几年内保持稳定。临用之前向装有上述抽提液的试管中加入约2%-3%(v/v)的β-巯基乙醇。
2、醋酸钠:
3 mol/L NaAc
用冰乙酸调pH值至4.8-5.2。
3、TE溶液:
4、其它:
无水乙醇,异丙醇,75%乙醇,酚:氯仿:异戊醇(25:24:1),氯仿:异戊醇(24:1),β-巯基乙醇,重蒸水。
六、 实验步骤
1. 样品研磨
1) 取1g的样品放入2ml ep管中
2) 加入1-2粒5mm研磨珠
3) 加入1ml的CTAB 抽提液
4) 将加有样品的ep管放入高通量组织研磨仪的适配器中,盖好
5) 将研磨转速调到1800,设定研磨时间为90秒(可根椐样品的研磨的难易程度来调节,此数据是以银杏落叶为样本得出)
6) 启动研磨仪对样品进行研磨(根据不同的样品,本身性质不同,需要对研磨频率和研磨时间进行适当的调整)
2. DNA的粗提
1) 将研磨好的样品取出于65℃水浴45min,中途间隔(轻柔)振荡三次混匀
2) 冷却后加入等体积氯仿:异戊醇(24:1),轻柔颠倒混匀使乳化10min
3) 7000g-8000g离心10min(18-20℃)
4) 吸取上清于另一干净的离心管中
5) (根据需要可用氯仿:异戊醇如上法重复抽提一次,吸取上清)
6) 加入与上清液等体积(且已于-20℃预冷的异丙醇,颠倒混匀,约1至2分钟后应有白色絮状沉淀出现(若没有,则加入上清液1/5至1/10体积的pH4.8-5.2的3M NaAc,混匀,于-20℃冰箱中沉淀30min)
7) 离心法沉淀DNA
8) 在75%乙醇中漂洗DNA数分钟以上,用Tip头吸干乙醇
9) 用1ml 75%乙醇再漂洗一次
10) 沉淀于室温或64℃以下的恒温箱中干燥片刻至刚出现半透明,不要过度干燥
11) 用50μlTE溶解沉淀,可用65℃水浴助溶,DNA粗提物可用于粗略PCR等。
3. DNA的纯化
1) 向TE溶解的DNA粗提物中入4-10μl RNaseA(约40-100μg)
2) 于37℃酶解RNA 1hr或65℃酶解RNA 30min以上
3) 加入50μl酚:氯仿:异戊醇(25:24:1),轻轻颠倒混匀10min
4) 10000g以上常温离心10min,吸取上清
5) 加入50μl仿氯:异戊醇(24:1)轻轻颠倒10min
6) 10000g以上常温离心10min,吸取上清 (根据需要可重复用氯仿:异戊醇如上法再抽提1-2次,以充分去除蛋白和酚)
7) 向上清中加入1/5-1/10体积的pH4.8-5.2的3M NaAc,并加入2.5倍体积无水乙醇,于-20℃沉淀30min以上
8) 12000g、4℃低温离心10min,吸干液体
9) 沉淀用75%乙醇漂洗二次
10) 沉淀于室温或64℃以下恒温箱中干燥片刻至刚开始出现半透明状,勿过度干燥加入50μl重蒸水溶解DNA,可于65℃水浴助溶
11) 取5μl DNA电泳检查DNA的质量
12) 100-500倍稀释后于分光光度计上测定OD260及OD280,分析DNA的浓度和质量
13) 保存DNA于-20℃
补充:如果需要提取的样品比较多(比如1g),研磨好的样品在后续的提取中,需要转移到大的epp管中,研磨时可以加入较少的抽提液,研磨完毕按照1g样品10ml提取液补充抽提液,进行后续的操作。
振动球磨仪:高效、均匀、可控的样品破碎方法
在科学研究和工业生产中,样品的处理是非常关键的步骤。组织研磨仪是一种能够高效、均匀、可控地破碎样品的设备,广泛应用于生物学、医学、材料科学等领域。
一、工作原理
振动球磨仪主要基于高速旋转的研磨球对样品进行破碎。在研磨过程中,样品被放置在研磨球和研磨腔之间,通过高速旋转的研磨球对样品进行冲击和摩擦,使样品破碎成更小的颗粒。这种研磨方式能够有效地保护样品的原始结构和成分,提高实验的准确性和可靠性。
二、技术特点
高效性:能够快速将样品破碎成均匀的细小颗粒,提高实验效率。
均匀性:研磨球在样品表面高速旋转,产生高能量碰撞和摩擦,使样品破碎成更小的颗粒,保证样品的均匀性。
可控性:研磨过程可以通过调节研磨球的数量、大小以及旋转速度进行控制,实现样品的精细破碎。
保护性:能够有效地保护样品的原始结构和成分,提高实验的准确性和可靠性。
方便性:操作简单,易于控制,能够保证实验结果的重复性和可比较性。
三、应用场景
生物学应用:在生物学领域,组织研磨仪被广泛应用于组织样品的破碎和制备,如动物组织、植物组织等。通过对组织样品的破碎和磨碎,为后续的生物化学分析、基因组学和蛋白质组学研究提供均一、稳定的样本。
材料科学应用:在材料科学领域,组织研磨仪被用于对各种材料进行破碎和磨碎,以获得具有特定物理和化学性质的粉末或颗粒。例如,对陶瓷、金属、高分子材料等进行破碎和磨碎,以制备具有特定粒度和组成的复合材料或纳米材料。
医学应用:在医学领域,组织研磨仪被用于对生物医学样品进行破碎和制备,如病理组织、生物细胞等。通过对样品进行破碎和磨碎,为后续的医学研究和诊断提供准确的数据支持。
其他应用:除了上述应用领域外,组织研磨仪还被广泛应用于食品工业、制药工业、环境监测等领域。例如,在食品工业中,组织研磨仪可用于对食品原料进行破碎和磨碎,以提高食品的口感和营养价值;在制药工业中,组织研磨仪可用于对药物原料进行破碎和磨碎,以制备具有特定药效的药物颗粒。
振动球磨仪是一种高效、均匀、可控的样品破碎方法,广泛应用于各个领域。通过对样品的破碎控制和均匀处理,能够为后续的分析和测试提供稳定的数据支持,提高实验和生产的效率和质量。
应用组织研磨仪:从生物学到材料科学的研究仪器
组织研磨仪是一种重要的实验设备,广泛应用于生物学、医学、材料科学等多个领域。它通过高速旋转或振动,将组织样品研磨成均匀的细粉末,以便进行后续的分析和实验。本文将探讨应用组织研磨仪在生物学和材料科学领域中的应用及其重要性。
一、生物学研究
在生物学研究中,组织研磨仪被广泛应用于样品的制备和预处理。例如,在基因组学和蛋白质组学研究中,需要对动植物组织、微生物样品等进行研磨和破碎,以释放出其中的DNA、RNA和蛋白质等生物分子。通过组织研磨仪的研磨作用,可以快速、有效地将样品破碎成细粉末,提高样品的提取效率和实验的准确性。
此外,组织研磨仪还被广泛应用于免疫学、病理学等领域的研究。例如,在免疫学研究中,需要对免疫细胞进行分离和纯化,而组织研磨仪可以用于破碎免疫器官和细胞,提高细胞的分离效率和纯度。在病理学研究中,组织研磨仪可以用于制作病理切片,对疾病进行诊断和治疗。
二、材料科学研究
在材料科学研究中,组织研磨仪也具有广泛的应用。例如,在材料合成和制备领域中,需要对原材料进行破碎和混合,以制备出具有特定结构和性能的材料。组织研磨仪可以通过调整研磨时间和研磨力度等参数,控制材料的粒度和分布,提高材料的制备效率和性能。
此外,组织研磨仪还被广泛应用于材料的表征和分析中。例如,通过组织研磨仪的研磨作用,可以将材料表面粗糙度降低,提高材料的表面平整度和光滑度。同时,通过对材料进行破碎和混合,可以制备出具有特定结构和组成的材料样品,以便进行X射线衍射、电子显微镜等分析测试。
总之,应用组织研磨仪是生物学、医学、材料科学等多个领域中重要的实验设备之一。通过高速旋转或振动,它可以将组织样品研磨成均匀的细粉末,提高样品的提取效率和实验的准确性。同时,应用组织研磨仪还可以控制材料的粒度和分布,提高材料的制备效率和性能。