操作程序：

由您提供该实验中目的基因的相关资料（如：基因名称、序列等信息），我们共同探讨服务的可能性和技术路线；

商定服务收费、付款方式、服务期限等，并签定技术服务合同。

有您提供实验所需的足够量的实验样本（100mg组织或107个细胞），本公司不接受您提供的RNA样本

PCR所需引物/探针（如果用探针法），可以由您自己提供，也可以委托本公司设计合成（费用另计）。如果由您自己提供，必须是PAGE纯化的高质量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探针。

我们进行RNA抽提、RNA定量、反转录、Real-time PCR扩增、数据分析。

提供实验报告，包括实验过程、所用仪器试剂、扩增曲线、标准曲线和相关分析数据等。

自备物品：

15毫升锥形离心管：用于制备样品的容器

比色皿：用于比色的容器

96孔酶标板：用于比色的容器

分光光度仪：用于比色分析

酶标仪：用于微量样品比色分析

储存条件：

14℃或－20℃

准备物品

清理液（A）                                   毫升

染色液（t B）                                   微升

稀释液（C）                                   毫升

溶解液（tD）                                   毫升

产品说明书                                   1份

定量PCR方法：

a、竞争法

选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中，待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增（其中一个引物为荧光标记）。扩增后用内切酶消化PCR产物，竞争性模板的产物被酶解为两个片段，而待测模板不被酶切，可通过电泳或高效液相将两种产物分开，分别测定荧光强度，根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。

b、内参照法

在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物，内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记，下游引物不标记。在模板扩增的同时，内标也被扩增。在PCR产物中，由于内标与靶模板的长度不同，二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来，分别测定其荧光强度，以内标为对照定量待检测模板。

c、PCR－ELISA法

利用di高辛或等标记引物，扩增产物被固相板上特异的探针所结合，再加入抗di高辛或酶标抗体－辣根过氧化物酶结合物，最终酶使底物显色。常规的PCR－ELISA法只是定性实验，若加入内标，作出标准曲线，也可实现定量检测目的。

使用方法：

一、样品采集：

1、食品样品：样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。

2、血液样品：用抽取受检者静脉血2mL，注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管，立即混匀。

3、粪便样品：取粪便置于灭菌的收集管中送检。

4、病灶部位样品：取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。

二、稀释 PCR 阳性对照（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）

1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。

2. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。

3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液（最好用带芯枪头，下同）。

4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。

5. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用

6. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
服务流程：

接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

N-丁基二乙 99%反式 GR,99.0%(剧品)猪血浆激肽释放(KLKB1)免疫试剂盒

双酚A三双甲基烯酯 试剂级正丁  >99.5%(GC)猪血红蛋白(Hb)免疫试剂盒

1-苄基哌 97%正丁  ACS, ≥99.4%猪血管性血友病因子/瑞斯托霉辅因子(VWF)免疫试剂盒

3-溴 分析标准品，用于环境分析乙丁酯 for HPLC, ≥99.7% (GC)猪血管舒缓激肽(BK)免疫试剂盒

苯甲 无水级, 99.8%乙乙酯 AR,99%猪血管生成2(ANG-2)免疫试剂盒

乙基叔丁基 分析标准品乙乙酯  for HPLC, >99.0%(GC)猪血管生成1(ANG-1)免疫试剂盒

4-叔丁基吡啶 98%甲溶液 AR,含10-15% 甲稳定剂猪血管内皮粘附分子1(VCAM-1)免疫试剂盒

邻苯二甲丁苄酯 分析标准品甲 Standard for GC，>99.9%猪血管内皮生长因子(VEGF)免疫试剂盒

苯甲 Standard for GC，≥99.5%（GC)甲 AR，99.5%猪血管内皮钙粘着蛋白复合体(VE-cad)免疫试剂盒

聚氧乙烯月桂 高纯级，Brij-35甲 CP，99.5%猪血管紧张转化2(ACE2)免疫试剂盒

2-溴乙 分析标准品甲 AR,无水级猪血管紧张转化(ACE)免疫试剂盒

2-溴-5-吡啶 99%甲  for HPLC, ≥99.9%猪血管紧张Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫试剂盒

溴代硝烷 90%甲 农残级, ≥99.9%猪血管活性肠肽(VIP)免疫试剂盒

双(4-)磷酯 99%甲  ≥99.9%(GC)猪旋毛虫IgG抗体免疫试剂盒

2-环己基溴乙烷 98%甲 ACS猪β4（Thymosin β4）免疫试剂盒
**色葡萄球菌核酸检测试剂盒48T小鼠白介27（IL-27）ELISA试剂盒,吲哚-3-乙磷化腺单磷活化蛋白激β1抗体

兔子皮质*（Cortisol）ELISA试剂盒,吲哚-2-羧磷化间变型淋巴瘤激抗体

促卵泡（FSH）ELISA试剂盒--动物，人吲哚-2-羧磷化毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体

小鼠催产（OT）ELISA试剂盒,1,3-苯二磷化三磷腺柠檬裂解抗体

小鼠抑瘤M（OSM）ELISA试剂盒,1,3-苯二磷化ATR抗体

小鼠中性粒弹性蛋白（NE）ELISA试剂盒,1,3-苯二核重定位及纺锤体检查点蛋白AMN1抗体

小鼠抗凝血受体（ATR）ELISA试剂盒,Fmoc-O-磷基-L-酪氨天门冬酰连接糖基化11抗体

内肽-2（EM-2）ELISA试剂盒--动物，人2-甲氧基-4-(2-氨基乙基)衰老相关蛋白ASF1A抗体