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GL261+luc小鼠胶质细胞瘤+luc

型号
参数
供货周期:一周 规格:1 × 10^6 细胞数/1ml 应用领域:医疗卫生,化工,生物产业 主要用途:科研
武汉原生原代生物医药科技有限公司

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原代细胞,细胞系,培养基

武汉原生原代生物医药科技有限公司(原生原代,PriCells)于2009年成立。位于湖北省武汉市东湖高新技术开发区东湖国家自主创新示范区域,总部设立在武汉国家生物产业基地(即光谷生物城——光谷智慧健康园。作为中国专业的、专注的研发--生产--销售多种属组织源性细胞产品和提供细胞检测技术服务的生物医药企业,*独立起草和制定了“基于多种属组织源性细胞分离、培养、运输和检测的PriCells技术流程”的行业专业标 准,已被学术机构认可,被中国的学术机构和企业单位广泛应用。研发和生产的细胞产品主要面向科研院所、生物技术公司、制药企业研发中心和临床医疗机构。

 

      原生原代(PriCells)—— 细胞产品潜心研发已长达13年

      原生原代(PriCells)—— 细胞产品推向市场突破1000余种

      原生原代(PriCells)—— 细胞产品使用客户单位突破600余家

      原生原代(PriCells)—— 细胞产品学术文章引用累计数突破800余篇

 

 

 

 

 

 

 

详细信息

GL261+luc小鼠胶质细胞瘤+luc

细胞介绍

1939年3-甲基胆蒽颅内注射诱导Gl261肿瘤,经C57BL/6小鼠体内培养,经同基因小鼠株连续移植维持,于1990年代中期建立体外生长细胞培养;文献中描述了携带TP53和KRAS突变的细胞,该细胞通过慢病毒转染的方式携带Luc基因。


细胞特性

1) 来源:小鼠,胶质瘤

2) 形态:贴壁生长,胶质细胞,成纤维细胞样

3) 含量:>1x10^6 细胞数

4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

5)用途:仅供科研使用。


GL261+luc小鼠胶质细胞瘤+luc

运输和保存

干冰运输及复苏好存活细胞

(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。

(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。


细胞接收后的处理:

1)收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。

2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。

3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的*培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。

4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。  收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。


一.培养基及培养冻存条件准备:

1)准备DMEM 基础培养基            (推荐:0001)                 87%

      优质胎牛血清                                                                              10%

      GlutaMAX-1谷氨酰胺               ( 推荐:0900 )                1%

      HEPES 1M Buffer solution         (推荐:01200)                1%

      P/S青霉素-链霉素                                                                        1%.

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。


二.细胞处理:

1) 冻存细胞的复苏:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL*培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,*培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml*培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。


2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于贴壁细胞传代可以参考以下方法:

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。 

3.轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的*培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。


3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

下面T25瓶为例;

1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×106~1×107个活细胞/ml.

2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×106~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。

3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

 

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供货周期 一周
规格 1 × 10^6 细胞数/1ml
应用领域 医疗卫生,化工,生物产业
主要用途 科研
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