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HPC-01 氨解仪(Biolytic)
高级会员第4年
生产厂家Biolytic中国提供的Dr. Oligo系列DNA合成仪为生产高质量的寡核苷酸提供了一种经济有效的解决方案。建立高质量标准,易于操作并具有中、高通量和自定义配置。Dr. Oligo系列DNA合成仪合成的DNA/RNA/寡核苷酸可用于寡核苷酸和基因合成、PCR / RT-PCR、siRNA / RNAi、 DNA / RNA测序、免疫和生物化学、高通量筛选、天然产物生物合成、基因构建、杂交、SNPs,其他诊断或治疗的研究。
一、DxOligo氨解仪(Biolytic)技术参数:
反应器容量:5.6升容量;
样品数量:1至5个,每个样品有96位;
温度范围:120°C;
保修:12个月;
电源:220V至240V/50/60Hz;
功耗:700瓦;
重量:30公斤;
二、产品可定制:
(1)Biolytic中国公司提供多种用于寡核苷酸/DNA合成和寡核苷酸纯化的仪器和配件。Dr.Oligo系列DNA合成仪、Oligo处理器和Dr.Oligo氨解仪(Biolytic)是在美国设计和制造的,满足任何实验室、科研院所或企业严谨的要求。
(2)我们所有的仪器和配件均采用最新的材料和技术,以提高操作效率和降低成本。每台仪器出厂前都经过严格的质量控制程序。我们以提供优质的客户服务和支持为荣,并致力于提供行业内安装和培训。所有仪器和配件都可以根据您的需求来定制。
三、产品优势:
DNA合成氨气氨解仪是为有效制备生物样品而设计的,用于PCR引物、探针和组分生产,DNA测序、DNA和RNA合成、随机启动、载体设计、DNA指纹和人工基因合成。是DNA/RNA/寡核苷酸脱保护基快捷高效稳定的解决方案。
四、和传统的氨解对比如下:
(1)采用Oligo高压氨解仪,一次性可以氨解480个样品并直接得到干燥的样品,氨解时间也大大缩短。
(2)传统的氨解步骤如下,费时费力。检查纯化所需材料及试剂是否充足,活化C18板(柱)向C18板加满0.5MNaCl,抽干,重复平衡3次,再加满分析纯,抽干5次以上,后以洗脱速度离心。洗脱后再向C18板内加满0.5MNaCl,抽干,重复3次,完毕再向C18板内加满0.5MNaCl以待用。C18柱活化,首先用20ml分析纯活化C18一次,吹干甲醇,然后用10mlNaCl平衡1次以待用。
(3)制板灌胶计算好预用分析板及电泳板数量以灌胶。胶液制作,每块板需50ml左右的16%的胶(短链,16%;长链,12%),每块板平均加入过硫酸铵100ul,TEMED30ul(依情况而定,可适量增减),摇晃,混匀,倒入板中,水平放置,使胶凝固。注意板中不能有气泡,并注意补胶。
五、注意事项:
①所用C18板需定期进行维护与检测。
②每一瓶新制胶使用之前需对胶跑Marker以保能正常使用。
③原理:切割—将合成好的寡核苷酸链从支持物上化学切割下来。用冰氨水来裂解CPG,连接化合物与初始核苷间的酯键。断裂下来的寡核苷酸带有自由的3羟基。脱保护基—用冰氨水处理较长时间以脱掉碱基环上的氰乙基、苯甲酰基、异丙基等保护基团。
六、单管氨解原理:
(1)将合成好的柱子用注射器针头将CPG或树脂粉末全部倒入氨解瓶中,并将对应的标签贴在氨解瓶上。
(2)加入冰三乙胺100ul,冰氨水1.5ml,盖紧瓶盖,放入80度烘箱氨解2小时。对用快速氨解单体合成的序列直接加氨水后55度2小时即可。在生产操作表上准确记录开始氨解的时间。
(3)注意事项:①在将引物放入氨解瓶时,要核对清楚标签,要一一对应。②三乙胺与氨水顺序要防止加反。(加反后会出现分层现象)。③氨解中使用的氨水必须是冰冻状态中的氨水。
七、2.96孔板氨解原理:
(1)90度氨解40min后取出,放入通风橱赶氨1min,高速离心。拿去合成板用20ul小枪取小样20ul;在向氨解板每孔内加入冰氨水200ul,封好胶带,用夹板夹好,登记好时间,放入80度烘箱氨解2h。
(2)注意事项:
①务必在氨解板正面贴上该轮次标签,然后再位置一一对应垫再合成板下面,一起氨解,离心。
②三乙胺与氨水顺序要防止加反。(加反后会出现分层现象)。
③氨解中使用的氨水必须是冰冻状态中的氨水。
④夹板密封时要注意拧紧,防止出现漏氨。