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天辰 高价回收二手进口液相色谱仪
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天辰 高价回收二手进口液相色谱仪
色谱是一种分离分析手段,分离是核心,因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好,分析速度快等。关于色谱柱的安装、维护、保存以及由色谱柱导致的这样那样的色谱故障也是一门学问。
加装保护柱——保护柱的作用是过滤掉来自流动相和样品的化学“拉圾”同时也可以有效除去流动相和样品中的不溶物。尽管现在的色谱仪在流动相吸入口、进样阀后部以及在色谱柱的两端都装有1、2μm等不同孔径的滤器,但滤器只能除去不溶性颗粒而不能除去化学污染,因此,加装保护柱是必要的,特别是在分析中药、中成药等复杂混合物和生物样品时更是保护分析柱的措施。保护柱填料应与分析柱一致,粒径可较分析柱大。保护柱属消耗品,经过一定次数的样品分析(50~100次)后,出现柱压显著升高或峰形变坏或基线漂移时,应考虑更换保护柱。
过滤流动相和样品——流动相通常由水或缓冲溶液与有机溶剂混合而成,原则上,所有经过色谱柱的流动相均应过滤,但在实际操作上应视具体情况而有所区别:当有机溶剂用色谱纯级,水用石英亚沸水或其它超纯水时,在能确保水和有机溶剂的质量且没有受到污染时,过滤并无更多实际意义。当流动相中含有缓冲盐时,则过滤是必要的,如前所述,当缓冲溶液放置一段时间(视环境温度不同而异,夏季一般不超过48 h,冬季一般不超过一周)后,在使用前还应重新过滤。所配制的样品试液在注入流路系统前均要经0. 45μm ( 0. 22μm则更好)孔径滤膜过滤。要注意区分水系和油系,二者不可混用,以防止滤膜溶解而造成污染。装流动相的容器和色谱系统中的在线滤器要定期清洗和更换,以避免滤器因过载而起不到过滤作用。
净化样品——当样品中含有对色谱柱有损害的化学成分,如产生性吸附的蛋白质、糖等有机分子和强吸附性物质,以及可能对柱填料产生破坏作用的基团离子。在进样前应尽可能对样品进行分离提纯以除去多余杂质组分。
避免高柱压——虽然高效液相色谱柱能耐受的压力可达6000 p si (磅/平方英寸) ,但过高及过大的压力变化均会缩短色谱柱的寿命,避免的方法是:
(1)柱压过高时,尽可能采用较小的流速,以不超过柱最大允许压力的一半为宜。
(2)当流速较大时,应采取流速梯度的办法使流速分步到位。
(3)使用手动进样阀时,进样阀的切换要尽可能的快。否则超过20%的压力冲击会很快使柱报废。当使用多柱联用时,柱切换要避免在高压下进行。
注意温度和酸碱度——一般以硅胶为基质的色谱柱最高使用温度不超过60℃,以低于40℃为宜,特别是在流动相pH接近使用限度时,更应降低使用温度。
温度过高会加快键合相的水解和硅胶的溶解,从而使填料性质改变,柱床塌陷,降低柱效,改变峰形。
目前的键合硅胶色谱柱标示的pH适用范围可达2~10,但在实际使用时应避的pH条件,特别是在偏碱性的条件(pH≥8)下使用 ,如必须要在的pH条件下使用时,可通过以下方法避免柱损害:
(1)在泵和进样阀之间加装预柱(饱和柱)来饱和流动相
(2)降低使用温度
(3)检验完毕后立即用与所使用的流动相互相混溶的“温和溶剂”*清洗
正确及时的冲洗——开始试验前,应了解柱中当前是何种溶剂。对于新色谱柱,如无特殊说明均为评价报告中所用流动相。柱中当前溶剂一定要与分析样品所用流动相互溶,如不能混溶,要用与二者均能相互混溶的第三种溶剂过渡。
液相色谱仪使用操作规程总流程:
超纯水冲洗柱――流动相分离样品――超纯水冲洗柱――纯乙睛保存柱
1.电源准备
打开稳压器电源开关,须待电压指示至220V后,才能开启其他有关设备。
2.LC-600高效液相色谱仪的准备
乙腈(Fisher公司产品色谱纯)
超纯水(Millipore超纯水)
冰乙酸
溶液配置:贮液瓶与流动相的准备
A液0.1%1ml,超纯水999ml)室温保存
B液60%乙腈(乙腈600ml,超纯水400ml)室温保存
样品液0.01%乙酸(冰乙酸10l超纯水100ml)室温保存
泵头冲洗液:精滤后超纯水或者是1%色谱纯甲醇室温保存
注:贮液瓶应用超纯水淌洗干净,备用。
流动相溶剂用洁净G4玻沙漏斗精滤除去微小颗粒(目前未滤过溶液)。
操作者必须清楚并注明A、B贮液瓶盛装为何种溶剂。
冲洗泵头:用注射管于软塑料管末端抽吸至有水流出,调节流速开关控制流速为20-30drop/min.(目前我们很少冲泵头。)
①流动相管道排气
如果,管道中气泡较多,可通过弹击管道,排除气泡,并逆时针旋转脱气泵活塞使其松动,用注射管于流动相出口的塑料管末端抽吸至管道内气泡排除*。操作时,我们通常已经打开了脱气机(气泡严重影响分离效果,所以观察管道中液体是否有气泡非常重要。)
②开机
③进入LC-600高效液相色谱仪操作系统
④数据记录的终止与保存
3.关机
1)N2000色谱工作站的关闭
在N2000的主操作界面上分别单击关闭泵、检测器图标,或通过菜单关闭。关闭电脑主机及显示器。将所有使用仪器用布盖好。关闭排气扇、空调与稳压器开关。
2)清洁卫生
实验完毕后,打扫仪器室桌面与地面清洁,保持桌面整洁。
3)仪器使用记录
记录当天的仪器使用情况于记录本上,包括仪器使用起止时间与出现问题的解决方案,并签上操作者的名字.
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