B-P-00002 3D细胞球体培养基质胶
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代理商深圳市安培生物科技有限公司(简称:安培生物)是一家集生命科学基础研究、基因治疗、细胞治疗商业化服务三大方向于一体的生物科技企业。
安培生物坚持为生命科学研究、活体动物转染、大规模生物生产、基因和细胞治疗领域客户,提供*细胞体内可代谢的核酸转染试剂;inviCELL™Platelet lysate无动物血清产品旨在支持广泛的细胞扩增和生产,包括培养间充质干细胞和多种免疫细胞系等,为制药公司或者生物技术公司提供无血清细胞培养规模生产服务;提供以植物生物为平台基因序列全人源化、*的细胞培养可分解3D基质胶产品;提供內毒素≦ 1.0 EU/mL、对细胞无毒性影响、高纯度的一型胶原蛋白产品。安培生物专注为生物医药领域提供优质的产品和技术服务,努力发展为基因治疗、细胞治疗的生物科技企业。
公司宗旨:致力成为推动生命科学进步的和值得信赖的合作者。
3D细胞球体培养基质胶
应用:
•3D 细胞球体培养
•小鼠皮下成瘤
•细胞侵袭
•适合用于 3D 细胞药物筛检平台
•细胞生长和分化
•代谢/毒理学研究
样本类型:
•肿瘤细胞系、哺乳动物组织
试剂组分
3D 细胞球体培养试验步骤:
A、试剂制备
1、A 基质胶:将 A 基质胶溶于 37℃水浴槽回温 10 分钟, 确认*融解.
2、C 缓冲溶液(1X)制备:使用前将 10X C 缓冲溶液用冰的无细胞培养液(例如: 无血清 DMEM、opt-MEM) 制备成 1X C 缓冲溶液。(不要用 PBS 稀释 C 缓冲液) .
3、D 缓冲溶液(1X)制备: 使用前用冷的 1x PBS 稀释 10X D 缓冲溶液至 1X D 缓冲溶液.
B、3D细胞球体培养基质胶的制备
全部步骤需要在无菌环境内操作,操作步骤如下:
1、将 24 孔培养板放置于冰上预冷半小时。
2、细胞计数后取 2×105~2×107 细胞与 0.5 毫升 37℃ 细胞培养基均匀混合,并与 0.5 毫升 37℃ A 胶 按照 1:1 等比例均匀混合,最终细胞密度 1*105~1*107cells/mL。 注:请选择适当的培养溶液与条件进行试验。
3、取 20-40 微升步骤 2 的混合液滴于 步骤 1 预冷的培养板上,胶体将于 5 分钟内成胶。 注: 测试胶 体是否成胶,可用微量吸管尖温和的触碰胶体表面进行确认。
4、待胶体成胶后,添加 1 毫升冰的 1X C 缓冲溶液,并盖过步骤 3 的胶溶液,固定 15 分钟。
5、待 15 分钟固定后,小心的吸取 C 缓冲溶液并置换为适合此细胞生长之培养基溶液。
6、将含有细胞的胶于 37°C 二氧化碳培养箱内进行 7~14 天的培养,并观察细胞球体的形成,按正常培养 基更换频率进行更换操作。
C、溶胶与收集细胞球体准备程序
1、小心的将培养基吸取移除,并用 1X PBS 进行清洗。
2、小心的将 1X PBS 吸取移除,并添加 1 毫升冰的 D 缓冲溶液,盖过胶滴于室温反应 5 分钟。
3、温和的用 1 毫升移液管吸取,直到胶滴*溶解。
4、将含有细胞球体的溶液吸入 1.5 毫升离心管,用 1000 rpm 的转速离心 10 分钟,移除上清液体并收集 细胞球体做分析。
D、收集单颗细胞准备程序
在分离单细胞前,先按上述溶胶与收集细胞球体准备程序进行操作
1、添加 trypsin-EDTA 并与收集的细胞球体于 37°C 混合反应。
2、用 1 毫升移液管混合,直到细胞体*分解。
3、待细胞球体*分解,加入 3 倍体积的 1X PBS,并用 1000 转的转速进行离心 10 分钟,并移除上清 液体收集沉淀的单细胞做分析。
B-P-00002系列基质胶可替代corning基质胶货号:356234、356235、356237、356230、356231、354248、354263
深圳市安培生物科技有限公司是美国Biozellen公司的中国代理商。Biozellen®3D细胞培养基质胶现货供应,经验证可*替代BD/康宁的基质胶,来源为植物源且氨基酸序列100%人源化,无人畜共患病的病原菌或毒素污染,提供完整售后服务和技术支持。尊敬的客户您如在订购过程中遇到任何问题都可以与我司客户经理联系寻求帮助。