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组织样本中甘油含量检测试剂盒
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生产厂家关于我们
上海信帆生物科技有限公司(Shanghai Xinfan Biotechnology Co.,Ltd)成立于上海,是一家集“产品研发、销售、技术服务”为一体的生物公司。经过多年的努力发展已成为专业供应各类生物科研用品的公司,长期专注于生物领域,旗下代理产品种类众多。信帆生物秉承以产品质量为根本,以市场需求为导向,以为客户创造价值为己任的精神,坚守产品质量的可靠、稳定,并严格秉承“专业、诚实、守信、创新”全过程、多方位的质量监控检测,从包装到品质,从产品到服务,每个环节,我们都严控质量关,力求为客户提供更好的、更专业性的技术服务和科研产品。我们供应的产品包括elisa试剂盒,生化试剂盒,动物血制品,抗体,质控品,干扰物质,抗原,生化试剂,实验耗材等10万余种类,公司长期致力于为客户提供RT-PCR检测、病理染色、免疫组化检测、Western blotting检测、生化检测、ELISA检测、放免检测等一系列实验代测服务。产品涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学的各个领域。
主营业务
主营产品: 质控品,干扰物质,抗体抗原,elisa试剂盒,动物血制品,生化试剂盒等。实验代做服务:HE染色/特殊染色/技术服务、免疫组化实验服务、Western blotting实验服务、RT-PCR实验技术服务,QPCR(荧光定量PCR)、酶联免疫ELISA、生化测试、液相气相检测、RACE、全基因合成、线粒体测序、基因克隆、定点突变、染色体步移、基因组全序列获取、环境微生物多样性、微生物基因组测序、微生物菌种鉴定、甲基化分析服务等。经销品牌:Abcam、Sigma、CST、Amresco、BD、Enzo、Bio-Rad、merck、Santa Cruz、Jackson、R&D、Merck Millipore、gibco、hyclone、Bio-World、NEB、Tocris、Corning、Axygen等等。
核心价值
公司本着以专业的产品、合理的价格、完善的服务,为客户提供更好的,更专业的技术服务和科研产品。公司以“质量为重,专业服务”的原则,致力于为用户提供高性价比的试剂盒和检测服务,提供全程咨询和技术支持,包括确定测定指标、选择合适的试剂盒规格、试剂盒保存、预测定和测定结果分析等。高质量的产品,让用户省心;专业的检测服务,让用户省力;优惠的价格,让用户省钱。信帆生物为广大用户提供各类检测服务,帮助老师轻松获得了真实可靠的检测数据,显著提高了用户的科研效率,为其发表高水平的研究论文提供了坚实的平台;为研究生按时毕业,导师顺利结题、申请新课题和晋升职称提供了实实在在的帮助,公司客户遍布国内各大学、医院、研究所、卫生防疫、生物公司等单位。
所有产品仅供科研使用,不能用于食用和医疗等
组织样本中甘油含量检测试剂盒
甘油测定
1. 参见下表加样。待测样品体积 10µl,多加可能会抑制反应。
2. 37ºC 或 25ºC 反应 10 分钟。反应平衡后颜色在60 分钟内稳定。
3. 先用蒸馏水+工作液的空白管调零,然后测定各管 OD 值。
4. 绘制标准曲线并计算甘油浓度。
附 Excel 作图步骤:各标准管 OD 值为 y 轴,标准品浓度为 x 轴。(1)鼠标左键圈住数据,点击做图向导,选择-散点图-,点击-完成-。(2)鼠标右键点图上的某一点,点击-添加趋势线-,点击-选项-,点击-显示公式-和-R2 值-。
5. 以每 mg 蛋白浓度或细胞数校正甘油含量。见说明书
说明:
1.血红蛋白>2g/L、胆红素>0.25g/L、二硫苏糖醇、巯基乙醇、高浓度EDTA干扰测试。
2.红细胞糖酵解时合成磷酸甘油影响测定。
原理:在 ATP 存在下甘油被甘油激酶磷酸化为 3-磷酸甘油,再被甘油磷酸氧化酶氧化产生过氧化
氢;在过氧化物酶作用下生色底物转化为苯醌亚胺,其光密度值与甘油浓度成正比。
适用范围:测定实体组织、细胞中的甘油浓度。组成 (105 次微板测定或 30 次 1 ml 比色杯测定):
(1) 裂解液 50 ml
(2) R1 试剂 16 ml
(3) R2 试剂 4 ml
(4) 4 mmol/L 甘油标准品 1 ml
4 ºC,储存 3 月。
所需设备:酶标仪、生化分析仪或 721、722 型可
见光分光光度计。佳工作波长 550nm,如无此波
长建议优先选用 570nm、次选 530、490nm。
一 组织细胞裂解
细胞(包括分化的脂肪细胞)裂解: 消化、离心收集细胞。或直接在培养皿内裂解。通常6孔板单孔约2x106个细胞,75cm2瓶约1x107细胞。按比例每 1~2 x 106细胞加 0.1ml 裂解液,混匀,静置 10 分钟。
动物组织裂解:
切记要预先将新鲜组织切称重后再进行保存。组织冻存后再进行解冻、剪切、称重可能会产生严重的测量误差。离心管精确称重,加入组织块后再称重,二者相减(即减量称重法)计算组织量(约 100mg)。强烈建议按比例每 1mg 组织加10µl裂解液以减少样品间蛋白和脂质含量变异而产生的误差。(注意;裂解液用量在 1ml 或更多可保证有效的裂解与脂质提取)。用电动高速匀浆器或手动玻璃匀浆器破碎组织。(不推荐超声方法,因其不能*和均匀破碎。应根据预实验调整初始的组织细胞加入量),而后,静置 10 分钟。
组织样本中甘油含量检测试剂盒