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Moregate FBSF-500澳洲血清
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我的胎牛血清中含有絮状沉淀,会对细胞培养有影响吗,如何去除?
Moregate FBSF-500澳洲血清用于细胞培养的胎牛血清以及其它血清中可能会存在以下种类的沉淀物:
1. 纤维蛋白,它是经常出现的较大的沉淀物,可以达到1 -2mm,可以用肉眼观察到。因为血清都是在低 温下进行收集和快速处理的,一些纤维蛋白原(可溶性的形成絮状纤维蛋白的前体)在处理过程中仍然处 于溶解状态,而当经过最后的过滤分装后,就会在瓶中凝结出现纤维蛋白沉淀。
2. 磷酸钙,它也是常见的一种沉淀物,通常会使血清出现浑浊,并且在37P培养的时候会増加。这种沉淀 物在倒置显微镜下观察像小黑点,这些小黑点由于布朗运动看上去可以活动,因此经常被误认为是微生 物污染。
3. 胆固醇、脂肪酸酯以及一些不溶性脂蛋白质。它们也是血清中出现沉淀物的常见原因之一。
通常以上这些沉淀物不会影响血清的品质,如果您希望除去这些沉淀物,可以将血清转移到无菌离心管 内,以400g进行离心,高心后将上清液加入预过滤培养基直接使用即可。我们不建议您以过滤的方法除去 这些絮状沉淀物,因为它们可能会阻塞您的过滤膜。
怎样解冻胎牛血清以保证其品质不受影响?
我们建议您首先将冷冻室里取出来的血清放进冷藏室,在2-8P的条件下放置12-24小时使之部分溶解, 然后将其取出置于室温下全部解冻。解冻后的血清因立即使用,如不使用应分装后冷冻保存,在分装之前, 应充分混匀血清。
注意:不要将胎牛血清在37P条件下放置过久。在此条件下,血清可能会变浑浊,而且由于血清中的某些 组分对温度比较敏感,其性能也可能受到影响。
如果我拿到的胎牛血清已经部分解冻,还可以使用吗?
所有Moregate胎牛血清在运输的过程中都保存在干冰里,因此您应该得到冰冻的产品。如果血清部分解 冻,可以继续使用,应待其*解冻后马上使用或分装后冷冻保存。
什么是热灭活,为何要热灭活,具体如何操作?
热灭活是指以56P, 30分钟水浴处理已经解冻的血清,使血清中的补体灭活。
基于补体的热敏感性,加热可以灭活补体系统。激活的补体参与补体介导的细胞毒作用(complement dependent cytotoxicity, CDC ) o CDC可导致溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,刺激细胞和血小板释放组 胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。
Moregate FBSF-500澳洲血清具体操作上,应准备一个和血清瓶同等大小装满水的塑料瓶,在塑料瓶中插一支温度计,与血清一起放置在 水浴锅中,待温度计温度达到56P后开始计时,30分钟后立即取出血清使用或分装。
注意:不宜将血清在更高的温度下放置更长的时间,否则可能导致血清中的蛋白质发生变性,从而影响产品 的性能。
y-射线的照射对血清有什么重要性?
y-射线可以有效打断微生物的DNA和RNA,从而使动物原性成分中的细菌、病毒和支原体失活。一般使用 射线对动物血液产品进行照射时,其照射计量不得低于25kGyo已经证实射线对病毒的灭活可达6-8个对数 值,而对支原体则是6-7之间。而当照射计量在25-45kGy之间时,血清的理化性质和细胞培养性能都不会 发生改变。