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普通PCR检测

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上海达为科生物科技有限公司

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   上海达为科生物科技有限公司,位于上海长江软件园,公司目前具备较好的生物学、医学技术服务平台,能够为广大客户提供医学科研样本检测、合作研究、开发及生产服务。

公司拥有专业的实验室、先进的实验设备和经验丰富的科研技术人员。技术团队包括研究员(博士后)2人,助理研究员(博士)4人,核心研究员(硕士)15人,主要致力于基因组学、转录组学、蛋白质组学、代谢组学、生物化学、病理检测、基因检测等技术在科研中的应用与推广。通过高度细分、较好的服务平台,为广大客户提供了完善的技术解决方案和服务。目前,,涉及临床医学、肿瘤生物学、免疫学、细胞生物学、分子生物学等生命科学、医学等诸多领域。

我们的目标是为了使您的工作更轻松、更快捷。为了实现一站式服务我们不断更新实验方法和引进新的产品,控制和降低各种成本,为您的研究加油。这既是一项长期而艰巨的工作,又是一项光荣的工作,同时也是我们企业发展的动力源泉。





详细信息

普通PCR检测实验服务介绍:

普通电泳PCR实验的原理是DNA分子在电场中会向正极方向移动。不同长度的DNA由于受到凝胶介质的阻力不同,表现为不同的迁移率而被分开。

1.试剂:

PCR产物,TAE电泳缓冲液,1000x溴化乙锭储存液,电泳级琼脂糖,DNA分子量标准

2.实验准备:

配制TAE电泳缓冲液(50x储存液,pH约8.5: Tris 碱242g 57.1ml冰已酸,37.2g Na2EDTA.2H2O,dd water定容至lL),6x加样缓冲液(0.25%溴酚蓝,40%蔗糖水溶液) ; 1.5ml 离心管装入铝制饭|盒(灭菌)、移液器吸头装入相应的吸头盒(灭菌)。

3.操作步骤:

(1)称取0.4g琼脂糖粉,放入三角瓶,加入50ml TAE电泳缓冲液(1x),放入微波炉中烧开( lmin)。注意观察烧瓶中的琼脂糖粉末,待*熔化后停止微波炉(切不可让胶溶液溢出到微波炉中! )。

(2)戴上线手套,从微波炉中取出三角瓶,置桌面上冷却致不烫手(约50-60°C)。

(3)把梳子插到凝胶灌制模具的正确位置后缓缓倒入胶溶液。胶溶液倒至与模具的矮边缘相平即可,不要把胶溶液溢到外面。在桌面上静置10-20分钟待胶*凝固。(剩 下的胶溶液封口后留待以后再熔化使用)。

(4)在水平电泳槽中加满1xTAE电泳缓冲液。根据电泳槽的长度把电泳仪的电压调至170V(10V/cm),注意正负电极的位置连接正确。

(5)待胶*凝固后( 15-20分钟),小心拔出梳子。用手指捏住模具两侧的高边缘取出模具和凝胶放入电泳槽中间的平台上,凝胶要没入电泳液中。凝胶上有样品孔的侧要朝向电泳槽的负极。

(6)在凝胶上选择相邻的加样孔。用10μl 的吸液头分别将管中的样品加入凝胶的加样孔中(如果需要时,在相邻的加样孔中加入1.5-3ul DNA分子量标准物)。

加样时持移液器的手以肘部固定在桌上,用另一只手扶住这只手的手腕,以减少移液器的抖动。看到蓝色的样品吸管尖头伸进加样孔后(不能伸得太深,以免穿破凝胶的底部)缓缓将蓝色的样品压入加样孔中。切不可使蓝色样品流到孔外。

(7)打开电源开关,样品将形成条蓝色的横带 向前移动 (如果发现蓝色向后移动,立即关闭电源,调换电极)。电泳将进行约30min。

(8)当蓝色的溴酚蓝迁移到距凝胶边缘1cm时,关闭电源。取出模具和凝胶。放入凝胶成像系统中拍照。


科研实验服务:

1.基因组学:基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析

2.转录组学:microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq

3.蛋白质组学:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因检测:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白质检测:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA

6.病理检测:HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选

7.代谢组学:GC-MS、LC-MS、NMR


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