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Nanocoulter Ⅰ 纳米颗粒分析仪-纳米粒度仪-粒径仪
- 型号
- Nanocoulter Ⅰ
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详细信息
纳米颗粒分析仪-纳米粒度仪-粒径仪 Nanocoulter Ⅰ
一种全“芯”的细胞外囊泡检测手段
胞外囊泡主要由微囊泡（Microvesicles, MVs）和外泌体（Exosomes, Exs）组成，微囊泡是细胞激活、损伤或凋亡后从细胞膜脱落的小囊泡，直径约为100nm – 1000nm。外泌体（exosome）是一种由细胞释放到细胞外基质的膜性小囊泡，直径约为40-100nm（有说30-150nm，目前尚无定论），广泛存在于细胞培养上清以及各种体液（血液、淋巴液、唾液、尿液、精液、乳汁）中，携带有细胞来源相关的多种蛋白质、脂类、DNA、mRNA、miRNA等，参与细胞间通讯、细胞迁移、血管新生和免疫调节等过程。在糖尿病、心血管疾病、艾滋病、慢性炎症疾病以及癌症中都发现细胞外囊泡水平的升高，它们很有可能成为这类疾病的诊断标志物。
相比外泌体研究遍地开花的火热程度（仅国内6月份就有217篇相关论文），外泌体纯化和提取方法可谓是差强人意。目前主流的方法有超速离心（UC）、密度梯度离心（DGC）、免疫捕获、聚合物沉淀（Precip）、超滤（UF）、排阻色谱（SEC），以及微流控分析芯片等。往往一种提取方法无法得到足够纯度、浓度的外泌体，每种方法的适用样品种类也不一样。
图1 细胞外囊泡的形成过程
国际细胞外囊泡学会（ISEV）在2014年提议，对于分离获得的外泌体需要从三个层面进行鉴定：
（1）Western Blot（WB）鉴定外泌体表面标志物；
（2）透射电镜（TEM）鉴定外泌体形态；
（3）粒径分析鉴定外泌体大小。免疫印迹与电镜观察耗时长、操作复杂、价格昂贵，在实际研究中难以做到每个外泌体样本都去做WB与TEM，所以急需一种快速简便的粒径分析方法，来作为外泌体鉴定的 “先锋部队” 。
Nanocoulter Ⅰ “芯”方式助力外泌体提取纯化研究
图2 Nanocoulter Ⅰ外观
纳米颗粒分析仪-纳米粒度仪-粒径仪 Nanocoulter Ⅰ 单颗粒检测，可液体活检、一个样本测试仅需5-10分钟，测试样本0污染可回收等特性，恰好贴合该需求，目前已经广泛应用于细胞外囊泡（外泌体）的提取鉴定工作中。
图3 Nanocoulter Ⅰ原理图
图4 Nanocoulter Ⅰ核心技术
纳米库尔特原理，测试过程是将待测外泌体分散在电解液中，随其通过特定孔径的纳米孔芯片，外泌体通过纳米孔的一瞬间会占用相同体积电解液的位置，在孔内外两电极间的电阻（恒电流设计的电路）会发生瞬时变化，产生电位脉冲。脉冲信号的强度和次数与通过纳米孔的外泌体颗粒大小及数目成一定比例，直接将脉冲信号进行转换，即可获得检测样品中外泌体的粒径和粒子数信息。
纳米颗粒分析仪-纳米粒度仪-粒径仪 Nanocoulter Ⅰ采用新一代电学原理，
•单颗粒检测，颗粒粒径、浓度、zeta电位、形态多维度检测
•不受样本吸光度、折射率影响，与样本光学性质无关
•与颗粒布朗运动无关，不受样品黏度影响
•颗粒之间无干扰，对多分散样本有很好的测试效果
•高分辨率，可精确看到样本团聚、破裂、沉降等细微变化
选型表
Nanocoulter Ⅰ 性能参数：
随着研究的深入，更多的分离提取外泌体的方法被开发出来，也有多种提取方法联用的方式，看似百花齐放，实则良莠不齐，甚至都不尽如人意。Nanocoulter Ⅰ 逐个测量外泌体粒径，得到外泌体的真实粒径浓度分布，可快速判断提取方法的优劣。
图5 不同分离提取方法的外泌体粒径测定
Nanocoulter Ⅰ的原理决定测得的数据为真实粒径信息，无需经过反演算或者推导得出，并且配备多种尺寸的已知粒径和浓度的标准颗粒（60-300nm，20nm一个梯度）来作为基线数据，实现测量数据的定量校准，确保粒径、浓度数据的绝对准确。无论是不同粒径的混合样本，还是有细微差异的同粒径样本，均能准确无误的辨别出来。
图6 不同厂家生产的标准微球的细微差异
图7 外泌体样本检测信号脉冲图
图8 外泌体样本测试报告
应用领域：
脂质体、病毒与类病毒颗粒生产品质把控及标准制定（mRNA疫苗 细胞治疗、基因治疗）；
细胞外囊泡、外泌体不同提取方法的筛选，外泌体的鉴定；
药物载体、蛋白质、疫苗、人造乳糜颗粒的粒径、浓度测定，生产批间差控制；
血细胞、血小板、细菌（油田等）、免疫检测功能颗粒等微粒的计数；
聚苯乙烯微球、磁珠颗粒等有机和无机颗粒品质把控；
化妆品、半导体、工业涂料、染料与墨水化学、机械抛光、催化剂等工业生产材料性能研究。
