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NR-1-M 硝酸还原酶(NR)测试盒(NADH速率法)
中级会员第2年
生产厂家莱贸生物科技(上海)有限公司,位于上海张江高科技术园区的创新型生命科学公司,自2012年成立以来,始终面向生命科学领域,从事科研机构及生产企业所需的各类试剂和试剂盒等,并提供代测服务及相关产品的技术支持和服务。公司具备快速高效研发、生产能力,汇集了大量生物工程行业的高尖人才,与国内科研院校联合开发新产品试剂盒,在生物技术行业拥有竞争力。莱贸生物自成立以来发展迅速,产品服务得到全国广大生产企业、高校、科研院所、医疗系统及相关同业的肯定,长期合作的客户遍及全国各地。公司拥有自营进出口权,为更好地服务广大用户,将Lifemall的质量管理提升到国际水平,我们竭尽所能!愿与广大生命科学工作者携手迎接属于生命科学的21世纪,共同创造新世纪的生物技术革命。
微量法 100 管/96 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义
NR( EC 1.7.1.3)广泛存在于植物中,是植物硝态氮转化为氨态氮的关键酶,也是诱导酶,对作物的产量和品质有影响。
测定原理
NR 催化硝酸盐还原为亚硝酸盐,NO3ˉ +NADH+H+→ NO2ˉ +NAD++H 2 O;NADH 在 340 nm 有最大吸收峰,通过测定 NADH 减少速率来表示 NR 活性。
需自备的仪器和用品
酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制
诱导剂储备液:
液体 50mL×1 瓶,4℃保存。
提取液:液体 120mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 10mL×1 瓶,-20℃保存。
试剂二:粉剂×2 瓶,-20℃保存;临用前每瓶加 2mL 提取液溶解,现配现用。诱导剂应用液的配制:用时将诱导剂储备液稀释 10 倍,即取 10mL 诱导剂储备液加 90mL蒸馏水,充分混匀。动植物组织样品的前处理:
(1)取适量诱导剂于烧杯中,将新鲜标本洗净,滤纸吸干,放入诱导剂应用液中(淹没即可),浸泡 2h,取出样本,滤纸吸干。
(2)按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入1mL 提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。硝酸还原酶(NR)测试盒(NADH速率法)