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TRXR-2-V 硫氧还蛋白氧化还原酶(TrxR)测试盒
莱贸生物科技(上海)有限公司,位于上海张江高科技术园区的创新型生命科学公司,自2012年成立以来,始终面向生命科学领域,从事科研机构及生产企业所需的各类试剂和试剂盒等,并提供代测服务及相关产品的技术支持和服务。公司具备快速高效研发、生产能力,汇集了大量生物工程行业的高尖人才,与国内科研院校联合开发新产品试剂盒,在生物技术行业拥有竞争力。莱贸生物自成立以来发展迅速,产品服务得到全国广大生产企业、高校、科研院所、医疗系统及相关同业的肯定,长期合作的客户遍及全国各地。公司拥有自营进出口权,为更好地服务广大用户,将Lifemall的质量管理提升到国际水平,我们竭尽所能!愿与广大生命科学工作者携手迎接属于生命科学的21世纪,共同创造新世纪的生物技术革命。
注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定
TrxR 是一种 NADPH 依赖的包含 FAD 结构域的二聚体硒酶,属于吡啶核苷酸-二硫化物氧化还原酶家族成员,与硫氧还蛋白以及 NADPH 共同构成了硫氧还蛋白系统。TrxR 与 GR 活性类似,催化GSSG 还原生成GSH,是谷胱-甘肽氧化还原循环关键酶之一。
测定原理:
TrxR 催化 NADPH 还原 DTNB 生成 TNB 和 NADP+,TNB 在 412 nm 有特征吸收峰,通过测定 412nm 波长处 TNB 的增加速率,即可计算 TrxR 活性。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、低温离心机、可调节移液器、1mL 玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:液体 90mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体 5mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂三:粉剂×1 瓶,4℃保存。临用前加入 5 mL 蒸馏水溶
粗酶液提取:
1. 组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 试剂一)进行冰浴匀浆。8000g,4℃离心 10min,取上清置冰上待测。
2. 细菌、真菌:按照细胞数量(104 个):试剂一体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL 试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7秒,总时间 3min);然后 8000g,4℃,离心 10min,取上清置于冰上待测。
3. 血清等液体:直接测定。
硫氧还蛋白氧化还原酶(TrxR)测试盒