10154ES PCR高保真酶预混液(含染料) PCR Master Mix
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生产厂家企业简介
翌圣生物科技(上海)股份有限公司【Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.】是一家以蛋白质改造和酶进化技术为驱动,聚焦生命科学产业链上游核心原料,从事分子、蛋白和细胞三大品类生物试剂的研发、生产与销售的高新技术企业,通过打通分子酶、蛋白、抗体、核酸、细胞的技术开发路径,成为国内少数同时覆盖三大品类生物试剂、兼备核心技术自主研发能力和规模化生产能力的高新技术企业,产品广泛应用于生命科学研究领域、诊断与检测领域和生物医药领域。
主营业务
公司凭借在蛋白质改造和酶进化领域的技术优势和深耕生物试剂行业多年积累的丰富经验,构建了品质优良、类型齐全、种类丰富的产品管线。自公司成立以来,公司研发、生产和销售的生物试剂超过3000种,涵盖分子、蛋白、细胞三大品类的生物试剂,能够满足客户多种类型生物试剂的一体化采购需求。公司核心产品覆盖qPCR系列、NGS系列、逆转录系列、核酸提取与纯化系列、PCR系列、分子克隆系列、体外转录系列、抗体、蛋白纯化系列、蛋白分析系列、重组蛋白、细胞分析系列、细胞培养系列、细胞转染系列、报告基因检测系列等多个品类的生物试剂,广泛应用于生命科学研究、诊断检测和生物医药等领域。
发展历程
荣誉资质
翌圣生物通过申请商标和软件著作权的方式保障核心技术和市场竞争力,不断加强公司品牌建设。截至2022年3月31日,公司已经获得授权18项(其中发明14项、实用新型1项、外观设计3项)和45项与生物试剂相关的软件著作权,拥有经国家知识产权局商标局核准的注册商标权37项以及4项境外注册商标,是国家高新技术企业和上海市专精特新企业。
创新平台
经过多年的产品研发技术经验的沉淀以及持续的研发创新,翌圣生物积极开展“产学研”合作,与拥有生物催化与酶领域国家重点实验室的湖北大学、拥有教育部工业生物领域重点研究基地的江南大学展开合作,优化生物试剂关键原料的生产和表达工艺。翌圣生物以基因工程技术、生物信息技术、细胞生物学技术、免疫学技术、生化分析技术等生命科学领域的共性生物技术为基础,建立了六大核心技术平台——双向分子酶理性设计与定向进化平台、密度发酵与超洁净纯化平台、分子诊断试剂关键原料研发平台、高通量测序建库试剂创新研发平台、高性能单克隆抗体研发平台和mRNA医药应用研发平台,目前已经自主研发出20项核心技术,打通分子酶、蛋白、抗体、核酸、细胞的技术开发路径,覆盖技术研发、产品升级、规模生产和质量控制等生物试剂研发和生产的各关键环节。
工业化生产
翌圣生物拥有按照准GMP 标准建设运营的工业化生产基地,配有吨级发酵线、工业级 AKTA 纯化线和全自动包装线。同时,公司通过了ISO 13485:2016质量管理体系认证,从原料控制、生产管理、质检管控、仓储运输等对生产线进行360度管理监督,保证产品过程的可控制性及可追溯性,竭尽全力为您提供可靠的产品。
客户服务
翌圣生物凭借优质稳定的产品质量、高效及时的响应能力、快速稳定的交付能力和周到完备的售后服务获得了众多科研用户和工业用户的认可,为检测公司、治疗公司、工具类公司和科学研究实验室提供应用于科学研究、体外诊断、基因测序、生物医药等的生物试剂。与中国科学院、清华大学、北京大学、复旦大学、上海交通大学、浙江大学等顶尖科研院所和华大基因、恒瑞医药、药明康德、之江生物、圣湘生物、斯微生物、金斯瑞、思路迪等工业客户建立了稳定、紧密的合作关系,公司产品被多次使用在Nature、Science、Cell等国际顶级期刊论文发表中。
公司企业文化
帮助客户创造价值,让世界更健康更快乐
◎ 成为生命科学工具领域全球Top⑩
◎ 具备驱动产业变革的技术创新能力
◎ 拥有一支持续学习型的翌圣铁军
翌圣生物始终秉承“帮助客户创造价值,让世界更健康更快乐”的使命,专注于技术创新和产品升级,不断拓展核心技术的应用领域,为客户提供更为的产品与服务,助力我国打造自主可控的生物试剂产业链。同时,翌圣生物将进一步推进国际化战略,继续布局和拓展海外市场,为全球生物试剂产业发展贡献力量。
产品简介
2×Hieff Canace® Plus PCR Master Mix (With Dye)是即用型2×预混合溶液,包含Hieff Canace® Plus High-Fidelity DNA Polymerase,dNTPs以及优化的缓冲体系。预混液中添加了常温可抑制聚合酶活性和3’→5’核酸外切酶活性的两种单克隆抗体,可简便地进行高特异性的Hot Start PCR。预混液中添加了延伸因子使得该酶具有长片段扩增能力,扩增目的片段的长度可长达13 kb,该酶具有5’→3’DNA聚合酶活性和3’→5’核酸外切酶活性,其保真性是Taq DNA聚合酶的83倍,是普通Pfu DNA聚合酶的9倍。适用于复杂模板的扩增,扩增产物为平末端。
2×Hieff Canace® Plus PCR Master Mix (With Dye)具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,反应体系只需加入引物和模板即可,并可以通过两步法的程序进行扩增,简化了实验步骤,节省了时间。本产品中含有电泳指示染料,PCR产物可直接进行电泳。另外,该产品还含有特异保护剂,使得预混液反复冻融后仍可维持稳定活性。
产品信息
货号 | 10154ES01 / 10154ES03 / 10154ES08/10154ES60 |
规格 | 100 μL / 1 mL / 5×1 mL/100×1 mL |
储存条件
-25~-15℃保存,有效期1年。
使用说明
推荐PCR反应体系
组分 | 体积(μL) | 终浓度 |
RNase-free ddH2O | to 50 μL | - |
DNA模板*** | 适量 | - |
Forward Primer (10 μM)** | 2 μL | 0.4 μM |
Reverse Primer (10 μM)** | 2 μL | 0.4 μM |
2×Hieff Canace® Plus PCR Master Mix (With Dye)* | 25 μL | 1× |
*在终浓度1×预混液含有1 U/50 μL的聚合酶、2 mM Mg2+和200 μM的dNTPs。
** PCR反应体系中引物终浓度的范围为0.2-1 μM,推荐0.4 μM。
***不同模板的推荐使用量(25 μL反应体系):
模板种类 | 扩增片段1 kb-10 kb |
基因组DNA | 50 ng-200 ng |
质粒或病毒DNA | 10 pg-20 ng |
cDNA | 1-2.5 μL(不超过PCR反应总体积的1/10) |
推荐PCR扩增程序
两步法程序(优先推荐)
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 98℃ | 3 min | 1 |
变性 | 98℃ | 10 sec | 30-35 |
延伸 | 68℃ | 30 sec/kb | |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
2)三步法程序(常规程序)
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性* | 98℃ | 3 min | 1 |
变性 | 98℃ | 10 sec | 30-35 |
退火** | 60℃ | 20 sec | |
延伸*** | 72℃ | 30 sec/kb | |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
*预变性温度和时间:推荐温度:98°C,时间:3 min,高GC含量模板5-10 min。
**退火温度和时间:推荐温度:60°C,也可根据需要,设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度。推荐退火时间设置为20 sec,可以在10-30 sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。
***延伸温度和时间:推荐温度:72°C。时间:30 sec/kb,复杂模板根据实际情况可延长至60 sec/kb。
3)梯度温度退火程序(难扩增基因推荐程序)
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 98℃ | 3 min | 1 |
变性 | 98℃ | 10 sec | 15,每个循环降低1℃ |
梯度退火 | 70-55℃ | 20 sec | |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | |
变性 | 98℃ | 10 sec | 20 |
正常退火 | 55℃ | 20 sec | |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
4)不同扩增程序下的特点
程序类型 | 两步法 | 三步法 | 梯度退火 |
速度 | 最快 | 中等 | 慢 |
特异性 | 高 | 中等 | 高 |
PCR产量 | 中等 | 最高 | 中等 |
检出率 | 高 | 中等 | 高 |
注意事项
1. 本产品仅作科研用途。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。