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起订量：
AZ00003 All-in-One RT SuperMix for qPCR试剂
- 型号
- AZ00003
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上海创凌生物科技有限公司位于上海杨浦科技园区，由生物领域专业人士创办，是一家集研发、销售、实验技术服务于一体的高科技企业。创凌坚持自己的经营理念，始终致力面向生命科学领域，从事生物医学技术服务的学术辅助/科研外包，科研机构及生产企业所需的各类生产原料、试剂、仪器、耗材等的业务。勤奋踏实地整合产品资源与技术资源，为高校、科研院所的科研工作者以及生物制品生产企业提供一站式产品服务方案，帮助科研及企业单位缩短科研时间、节约科研成本、提升科研水平、增强企业市场竞争力。
自成立以来发展迅速，产品服务得到全国广大生产企业、高校、科研院所、医疗系统及相关试剂公司的肯定，长期合作的客户遍及全国各地。为更好地服务广大用户，不断降低生产成本并向我们的客户提供更强大的产品服务。创凌竭尽所能，与广大生命科学工作者携手迎接属于生命科学的21世纪，共同创造新世纪的生物技术革命。
详细信息
储运条件
-20℃
产品组成
All-in-One RT SuperMix for qPCR试剂
产品简介
All-in-One RT SuperMix for qPCR(with dsDNase) 是一款高效、便捷、减少污染的高质量一链cDNA 合成试剂盒，包含M-MLV GIIIReverse Transcriptase 及其反应Buffer、RNA 酶抑制剂、dNTPs,Oligo(dT)20VN 和随机引物等一链cDNA 合成所需的所有组分，仅需加入RNA 模板和水即可开始反应。All-in-One RT SuperMix for qPCR(withdsDNase) 作为升级后的一链cDNA 合成试剂盒，15 分钟内最长可获得12 kb cDNA，产物可用于qPCR、普通PCR 等实验。从组织或细胞中提取的RNA 往往残留基因组DNA 污染，如果反转录前不做去除处理，下游进行qPCR 反应时基因组DNA 与cDNA会同时进行扩增，尤其是引物设计在同一外显子上时，影响定量准确性。本试剂盒所采用的dsDNase 能够特异性消化双链DNA 或DNARNA杂合双链中的DNA，并且具有热敏感性，在逆转录反应温度下即可快速不可逆地失活。与传统使DNase I 去除基因组DNA 污染的方法相比，dsDNase 无需额外加入EDTA 进行失活，不仅节省实验时间，而且降低了对逆转录反应的抑制。可依据基因组DNA 污染严重程度，选择去基因组DNA 污染与反转录分开进行，或者去基因组DNA 污染与反转录一步进行的操作方法。
使用方法
针对基因组DNA 含量低的RNA 样品（推荐方案）
All-in-One RT SuperMix for qPCR试剂
① 于冰上配制如下反应体系：
a. 推荐使用试剂盒提取的高质量RNA 作为模板。
② 轻柔吸打混匀，瞬离；
③ 37℃温育2 min，以去除基因组DNA 污染；
④ 55℃温育15 min；
⑤ 反应结束后，85℃温育2 min 以终止反应；
⑥ 迅速将获得的cDNA 置于冰上，用于后续实验；或立即保存于-20℃。
针对基因组DNA 含量高RNA 样品
1. 基因组DNA 污染去除
① 于冰上配制如下反应体系：
a. 推荐采用试剂盒提取的RNA 作为模板。
② 轻柔吸打混匀，瞬离；
③ 37℃温育2 min，以去除基因组DNA 污染；
注：若RNA 中基因组DNA 污染严重，可适当延长37℃温育时间至5 min。
④ 65℃温育2 min，使dsDNase 失活，然后置于冰上。
2. 第一链cDNA 合成
① 于冰上配制如下反应体系：
② 轻柔吸打混匀，瞬离；
③ 50℃温育15 min；
注：若目标RNA 不含Poly(A) 结构，可预先25℃温育10 min。
④ 反应结束后，85℃温育2 min，以终止反应；
⑤ 将获得的cDNA 溶液置于冰上，用于后续实验。
注：cDNA 溶液置于-20℃储存，建议不超过1 周；置于-80℃可长期储存。
注意事项
预混液中已经包含Oligo(dT)20VN 和随机引物，不仅适用于包含Poly(A) 结构的真核生物mRNA，也适用于不含Poly(A) 结构的原核生物RNA、真核生物rRNA 和tRNA 等模板，但不适用于miRNA 等小RNA 模板。
美国Azaood公司成立于2004年，是一家开发和生产用于生命科学研究、诊断和生物技术应用的高质量纯化酶、蛋白质、核酸和细胞分离试剂盒、胎牛血清的；Azood公司是通过了ISO9001认证的主要制造商，可以满足从研究到大规模批量生物加工和OEM应用与要求的公司。
