逸漠生物细胞复苏仪（培养仪器）

一、产品说明

逸漠生物细胞复苏仪（培养仪器）

货号SCT-300

解冻时间≤3分钟

货期现货

通道数量3个1.8~2.0 mL可立冻存管

单管典型容量0.8~1.5 mL

样品台控精度≤±1.0℃

二、细胞培养操作

收货方式T25瓶冻存管

收货处理观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁，将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h，以便稳定细胞状态收到细胞后，需立即转入液氮冻存或直接复苏

传代密度细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养第二天换液并检查细胞密度

传代比例传代建议1：2传代

1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿一管细胞建议接种到10cm培养皿或者T25瓶

传代方法a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，弃去消化液，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

c、按6-8 mL/瓶补加培养基，轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心4 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。

d、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。将含有1 mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

注意事项1.运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的培养基来培养细胞。

2.因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。1.收货时若发现干冰化完，检查冻存管是否融化，若已融化需直接离心细胞接种观察，若未融化可以将细胞按正常步骤保存;

2.为保证细胞的高存活率，收到产品后，请立即解冻复苏细胞。

到货须知1.收到细胞后，首先观察并拍照记录细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，干冰运输的细胞检查干冰是否挥发，细胞是否解冻，若有上述现象发生请及时和我们联系。

2.静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照(当天以及第 2,3 天请拍照)，记录细胞状态 (所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。

3.由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

4.仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

备注：客户在细胞培养过程中，有任何技术问题可以技术服务电话

三、细胞冻存操作

冻存液配方无血清冻存液，液氮储存

细胞密度待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例

冻存方法a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，加 1 mL血清重悬细胞，进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5x106~1x107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。

c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

注意事项冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案

四、售后服务

重发标准1.细胞运输途中遭遇的各种问题，细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等，重发;

2.收到细胞未开封，如出现污染状况，重发;

3.收到细胞3天内，发现污染问题，经核实后，重发;

4.常温发货的细胞静置 2 小时后，干冰冻存发货的细胞复苏 2 天后，绝大多数细胞未存活，经核实后，重发;

5.常温发货的细胞静置 22 小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏 2 天后，出现污染，经核实后，重发;

6.细胞活性问题，请在收到产品 3 天内给我们提出真实的实验结果，用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，经核实后，重发;

7.视具体情况而定。

不予重发1.客户操作造成细胞污染，不重发;

2.客户严重操作失误致细胞状态不好，不重发;

3.非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发;

4.细胞状态不好，未提供真实清晰的培养前 3 天的细胞状态照片，不重发;

5.细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的，不重发;

6.收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的，不重发;

7.视具体情况而定。