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50T 禽liu感通用/H5亚型（AIV-U/AIV-H5）核酸PCR试剂盒
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上海臻科生物科技有限公司（Shanghai Zhen Ke Biological Technology Co., Ltd. ）是一家专业从事“产品研发生产、市场销售、技术服务”为一体的高科技生物技术公司。 臻科生物依托国内外技术研发人才的优势，由留美资深科学家与数位国内多年从事生物领域研究的博士、硕士等高校生物领域研究人员共同创立，在科学研究和医疗检测领域享有*的声誉，自公司成立以来，公司的销售额保持高速增长，企业规模不断扩大，生产加工和销售的产品包括elisa试剂盒，动物血制品，抗体，标准品，检测卡，生化试剂等实验耗材等10万余种类，长期致力于ELISA试剂盒、生物试剂的研发，为客户提供引物设计与合成、免疫组化、PCR定量服务等一系列实验代测服务。
主营产品: 拥有发明的自主研发ELISA试剂盒，动物血制品，病理染色液，标准品，检测卡
经销品牌： Abcam、CST、BD Pharmingen、Santa Cruz、Jackson、R&D、Merck Millipore、gibco、hyclone、Amresco、Bio-World、Bio-Rad、NEB、Sigma、Tocris、Corning、Axygen(未提及的品牌，我公司可以代购)
实验代做服务： 酶联免疫ELISA、免疫组化（包埋，切片，HE）、Realtime PCR、流式细胞检测等 臻科生物产品已被广泛应用于化学、化工、生命科学的基础研究和开发应用、制药、疾病诊断与控制、人口与健康、生物技术等诸多领域，并销往全国各地，公司客户遍布国内各大学、医院、研究所、卫生防疫、制药公司、生物公司等单位，得到广大客户的*好评。
我们的宗旨是：为客户提供优质的产品和服务。 臻科生物以技术为核心并拥有完善的市场营销体系、现代化管理体系和专业化物流配送系统，满足了国内外生命科研人员的产品需求。公司专门设立优质完善的客服中心及技术中心，*时间为客户解决技术支持、产品跟踪以及售后等相关问题，旨在生命科学和医学科学研究领域创造具有竞争力的自主知识产权品牌产品。欢迎社会各界朋友前来洽谈业务，共创辉煌！
详细信息
【产品名称】禽liu感通用/H5亚型（AIV-U/AIV-H5）核酸PCR试剂盒
【包装规格】 50T/盒
【产品方法】双重实时荧光PCR法
【预期用途】
适用于禽liu感通用/H5亚型（AIV-U/AIV-H5）检测，可用于临床禽liu感通用/H5亚型（AIV-U/AIV-H5）感染的辅助诊断，但不作确诊使用。
禽liu感通用/H5亚型（AIV-U/AIV-H5）核酸PCR试剂盒【检验原理】
本试剂盒采用TaqMan 探针法实时荧光 PCR 技术，设计一对禽liu感通用/H5亚型（AIV-U/AIV-H5）特异性引物，结合一条特异性探针，利用相应仪器对PCR 过程进行实时监测，实现检测结果的定性分析，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
【主要组成成份】
反应液、酶液、阳性质控品、阴性质控品。
【储存条件及有效期】
-20℃±5℃，避光保存、运输、反复冻融次数不超过 5 次，有效期 12 个月。
【适用仪器】
ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。
【保存和运输】上述标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃，但不能超过 6 个月，标本运送应采用 2~8℃冰袋运输， 严禁反复冻融。
【使用方法】
1 样品处理（样本处理区）
1.1样本前处理
血液、体液和棉拭子样本取100μL 于 1.5mL 灭菌离心管中。
1.2 核酸提取
推荐采用核酸提qu或纯化试剂（磁珠法或离心柱法）进行核酸提取，请按照试剂说明书进行操作。
2.试剂配制（试剂准备区）
根据待检测样本总数，设所需要的PCR 反应管管数为 N（N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照；反应管 数每满 10 份，多配制 1 份），每测试反应体系配制如下表：
试剂 | RP反应液 | 酶液 |
用量（样本数为N） | 20μL | 1μL |
将混合好的测试反应液分装到PCR 反应管中，21μL/管。
3.加样（样本处理区）
将步骤1 提取的核酸、阳性质控品、阴性质控品各取 4μL，分别加入相应的反应管中，盖好管盖，混匀，短 暂离心。
4.PCR 扩增（核酸扩增区）
4.1将待检测反应管置于荧光定量PCR 仪反应槽内；
4.2设置好通道、样品信息，反应体系设置为25μL； 荧光通道选择： 检测通道（Reporter Dye）FAM， 淬灭通道（Quencher Dye）NONE，ABI 系列仪器请勿选择 ROX 参比荧光，选择 None 即可。
4.3推荐循环参数设置：
步骤 | 循环数 | 温度 | 时间 | 收集荧光信号 |
1 | 1cycle | 42℃ | 20min | 否 |
2 | 1cycle | 95℃ | 10min | 否 |
3 | 40cycles | 94℃ | 15sec | 否 |
55℃ | 30sec | 是 |
5.结果分析判定
5.1结果分析条件设定
设置Baseline 和 Threshold：一般直接按机器自动分析的结果分析，当曲线出现整体倾斜时，根据分析后图像 调节 Baseline 的 start 值（一般可在 3~15 范围内调节）、stop 值（一般可在 5~20 范围内调节），以及 Threshold 的 Value 值（上下拖动阈值线至高于阴性对照），重新分析结果。
5.2结果判断
阳性：检测通道Ct 值≤35，且曲线有明显的指数增长曲线； 可疑：检测通道 35值≤38，建议重复检测，如果检测通道仍为 35值≤38，且曲线有明显的增长曲线， 判定为阳性，否则为阴性； 阴性：样本检测结果 Ct 值>38 或无 Ct 值。
6.质控标准
阴性质控品：Ct>38 或无 Ct 值显示； 阳性质控品：扩增曲线有明显指数生长期，且 Ct 值≤32； 以上条件应同时满足，否则实验视为无效。
7.检测方法的局限性
1. 样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关；
2. 样本提取过程中没有控制好交叉污染，会出现假阳性结果；
3. 阳性对照、扩增产物泄漏，会导致假阳性结果；
4. 病原体在流行过程中基因突变、重组，会导致假阴性结果；
5. 不同的提取方法存在提取效率差异，会导致假阴性结果；
6.试剂运输，保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，出现假阴性或定量检测不准确的结果； 7.本检测结果仅供参考，如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段。
【注意事项】
1.所有操作严格按照说明书进行；
2.试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完quan混匀并短暂离心；
3.反应液应避光保存；
4.反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；
5.使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；
6.样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；
7.实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；
8.试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
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