细胞名称：小鼠肝细胞AML12ATCC

细胞代次：P4

细胞规格：T25瓶（包邮）/2冷冻管（需加干冰运输费）

细胞冻存：无血清冻存液

细胞传代：第一次建议1:2

1、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：

取出25cm2培养瓶，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态，然后换用新鲜*培养液继续培养或进行传代。

2、细胞传代：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；

2）添加0.25%Y蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入*培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；

3）弃上清，沉淀细胞用12ml*培养基重悬，然后按1:2比例进行分瓶传代，zui后放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；

4）待细胞*贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或传代。

3、细胞冻存：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；

2）添加0.25%Y蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入*培养液终止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；

3）用适量的冻存液（FBS：DMSO=9 ：1）重悬细胞，并放置于冻存管中；

4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。

4、细胞复苏：

1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；

2）将冻存管中的细胞移至含5ml*培养基的15ml离心管中， 1000rpm离心5min；

3）弃上清，沉淀用5ml*培养基重悬，接种25cm2培养瓶，于37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；

4）第二天，换用新鲜*培养基继续培养。

原代细胞与细胞系有什么区别？细胞培养物来源于原代外植体或分散的细胞悬液。通常在这样的培养物中细胞增殖形成汇合地单层细胞或密集地细胞悬液。根据传统定义，*次收获和接种的细胞被称为原代细胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 这类细胞生命周期有限，在有限的生命周期内需掌握好细胞zui大的生长空间，以保持细胞群中基因型和表型的*性。细胞系是不断生长，分化的细胞群，因其经过遗传改造，致使其具有无限增长的潜能。体外生长的细胞系用于医疗或科研。实际上，连续细胞系可以用大量次培养基培养，随着代数的增加细胞的基因型和表型都有可能发生改变。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。

1、倍增和代数有什么区别？倍增是培养物中细胞总数加倍，通常是指细胞指数或对数生长期。代数是指细胞群从培养瓶中移出，传代培养过程的次数，传代培养的目的是使细胞处于低密度以刺激其进一步生长。

2、接收到的冻存细胞该如何处理？收到包装箱后，立即将冻存细胞从干冰移入液氮中冻存。此过程尽量快以避免升温。不要将细胞储存在-80℃，这样会对细胞造成不可挽回的伤害。

3、有多少经验才能开始正常人类细胞培养？推荐有经验者在无菌环境下用层流净化罩工作，如果有经验的话对其它细胞类型也是很有利的。如果你是细胞培养的初学者或打算建立细胞培养实验室，我们会为你提供帮助。请的细胞培养专家。

售后服务告知书

1）细胞出现问题，可重发的情况有哪些？判定标准是什么？

1. 细胞运输途中遭遇的各种问题，细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等，重发；

2. 细胞污染问题，请在收到产品48小时内，给我们提出真实的实验结果，核实后重发；

3. 常温发货的细胞静置24小时后，干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后，绝大多数细胞未存活，（需提供真实清晰的细胞状态照片），重发；

4. 干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后或常温发货的细胞静置4小时候并且未开封，出现污染，重发；

5. 细胞活性问题，请在收到产品7天内给我们提出真实的实验结果，用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，核实后予重发；

6. 细胞收到当天以及第2,3天请拍照，3天未告知的，视为产品合格。4-7天内出现问题有提供收到细胞前3天照片和细胞出现问题时照片以及细胞相关操作的详细步骤的，并跟技术人员沟通的，由技术人员判定为我方责任的，重发。技术人员判定为双方承担责任的由双方进行协商处理或者按合同价的50%收费重发。

二）细胞出现问题，不予以重发的情况有哪些？

1. 客户造成细胞污染，不重发；

2. 客户不正确操作致细胞状态不好，不重发；

3. 非本库推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发；

4. 细胞状态不好，未提供细胞培养前3天照片的，不重发；

5. 细胞培养时经其它处理的，不重发；

6. 细胞收到2天内，未告知，不重发；

7. 视具体情况而定。

YS4483C人非小细胞肺腺癌细胞NCI-H2087

YS4484C小鼠脑微血管内皮细胞株bEnd.3

YS4485C人肺鳞癌细胞NCI-H2170

YS4486C人非小细胞肺癌细胞NCI-H2347

YS4487C肺支气管鳞状细胞癌KNS62

YS4488C人脑星形胶质母细胞瘤U-118 MG

YS4489C人肺腺癌细胞HCC95

YS4490C人肺腺癌细胞HARA

YS4491C人肺腺癌细胞EPLC272H

YS4492C人急性淋巴细胞性白血病细胞REH

YS4493C人横纹肌肉瘤细胞A-204

YS4494C人乳腺癌细胞SUM159PT

YS4495C小鼠肝细胞AML12

YS4496C人胚肾上皮包装细胞GP2-293

YS4497C非小细胞肺癌细胞NCIH810

YS4498C类滤泡状甲状腺癌细胞，肺转移FTC238

YS4499C胃癌细胞SNU-719

YS4500C胃癌细胞IM95m

YS4501C胃癌细胞OCUM-1

YS4502C大鼠骨髓瘤细胞IR983F

YS4503C人肾小管上皮细胞HKC

YS4504C非霍奇金淋巴瘤Karpas422

YS4505C骨髓白血病细胞MOLM16

YS4506C小细胞肺癌细胞NCIH196

YS4507C非小细胞肺癌腺癌细胞NCIH1793

YS4508C白血病细胞NOMO-1

YS4509C急性髓系白血病细胞OCIAML3

YS4510C急性粒细胞白血病OCIM2

YS4511C人非小细胞肺癌细胞NCI-H23

YS4512C人小细胞肺癌 NCI-H2227

YS4513C小鼠骨肉瘤成骨细胞K7M2-WT

YS4514C伯基特淋巴瘤Namalwa

YS4515C肝癌细胞SNU475

YS4516C小鼠胚胎成纤维细胞C3H/10T1/2, Clone 8

YS4517C人肺腺癌细胞HCC4006

YS4518C骨髓浆细胞瘤AMO1

YS4519C多发性骨髓瘤细胞L363

YS4520C肺癌细胞（大细胞肺1癌）CORL23

YS4521C非小细胞肺癌细胞CAL12T

YS4522C非小细胞肺癌细胞NCI-H2122

YS4523C人胚肺细胞NCI-H1563

YS4524C非小细胞肺癌细胞NCIH1838

YS4525C非小细胞肺癌细胞NCIH2110

更多细胞欢迎咨询我们：小鼠肝细胞AML12ATCC