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天狼猩红染色
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生产厂家上海达为科生物科技有限公司,位于上海长江软件园,公司目前具备较好的生物学、医学技术服务平台,能够为广大客户提供医学科研样本检测、合作研究、开发及生产服务。
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基本原理和用途
天狼猩红染色是一种用于组织学的染色技术,它利用强酸性染料天狼猩红与胶原纤维中的碱性基团反应,使胶原纤维特异性地着染为猩红色。这种染色方法
主要用于区分不同类型的胶原纤维,如I型和II型胶原纤维,在偏振光显微镜下可以进一步区分这些胶原纤维的类型。
此染色在研究各种组织病变时对胶原纤维异常或纤维增生的组织中具有重要的应用价值。
实验步骤和染色结果的解读
脱蜡至水:将石蜡切片依次放入二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ、二甲苯Ⅲ中各5分钟,以去除切片上的石蜡。接着,将切片依次放入无水乙醇、95%乙醇、75%乙醇中各1分钟,最后用蒸馏水洗5分钟。这一步骤的目的是使切片逐渐从有机溶剂过渡到水溶性环境,为后续染色做好准备。
2. 铁苏木素染色:在切片上滴加铁苏木素染液,染色时间为5-10分钟,以染出细胞核。然后用蒸馏水洗去多余的染色液,时间约为10-20秒。随后,
用自来水洗5分钟,以进一步清除残留的染色液。
3. 染色:在切片上滴加天狼猩红染液,染色时间为15-30分钟,以染出胶原纤维。然后,用流水稍冲洗,去除切片表面的染液。
4. 脱水透明:将切片依次放入75%乙醇、95%乙醇、无水乙醇中各1分钟,进行脱水处理。再将切片放入二甲苯中3次,每次1-2分钟,以达到透明效果。
5. 封片观察:使用中性树胶对切片进行封固。然后,在光学显微镜下观察染色结果,胶原纤维呈红色,细胞核呈棕褐色到黑色,肌纤维呈黄色。如有必要,可在 偏振光镜下观察,以区分不同类型的胶原纤维。
注意事项和实验技巧
在进行天狼猩红染色时,需要注意kuweisuan天狼猩红染液的使用,因为kuweisuan具有一定的毒性,操作时应采取适当的防护措施。此外,由于染色
可能容易掉色,应及时封片以保持染色效果。在染色过程中,染色时间可能需要根据实验结果进行调整,以获得最佳的染色效果。