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细胞划痕实验
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代理商伊莱博生物科技(上海)有限公司,公司总部位于上海长江软件园。2024年1月与上海大学医学院成立联合研究中心,主要以生命科学研究为基础,专注于研究成果转化及技术服务创新,建立了包含肿瘤生物学、病理学、免疫学、细胞生物学、生物化学与分子生物学以及动物实验等学科的研究服务体系,为医学领域的发展做出了重要贡献。
目前已建成并投入使用的实验室面积近2800平方米,包含基础实验平台、组学实验平台以及动物实验平台,基本能够满足科研课题研究的全流程。
伊莱博生物拥有专业的技术支持和实验操作人员团队,核心成员来自中科院、复旦、交大、同济等国内重点高校及科研机构,能够提供前沿的、完善的实验技术咨询与服务。
为了响应国家大力发展基础研究的号召,推动实验科学领域的进步,伊莱博生物充分利用积累多年的科研资源优势,为广大科研工作者提供实验技术培训服务,从理论和实操两个部分,培养其科研思维以及解决问题的能力,为今后的科研工作奠定坚实的基础。
实验步骤
标记六孔板
用marker笔在六孔板底部画平行线,平行线之间的距离0.5cm,为了保证后续拍照位置是相同的;
铺板
细胞重悬铺板,密度控制在第二天长满,若过夜后细胞wq长满,也可以适当延长培养时间,但如果细胞密度已经很大,尽量重新铺板,因为可能过一天后细胞太满,会导致细胞状态逐渐变差,后续细胞可能不迁移而是凋亡;
制造划痕
第二天用直尺比着使用10ul枪头制造划痕,划痕方向与标志线垂直,最好保持力度一致,尽量一次性划完,然后PBS冲洗3次,洗去漂浮的细胞
为了减少细胞增殖所引起的假阳性结果,降低细胞增殖对实验结果的影响,将wq培养基换成无血清培养基和低血清培养基(FBS<2%继续培养细胞);
拍照
拍照前最好用PBS冲洗3次,一般认为24h为细胞的一个周期,所以检测时间最好不要超过一个周期的时间,按照6孔板背后画线的垂直方向划痕