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一氧化氮（Nitric oxide，NO）含量测定试剂盒
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上海牧荣生物科技有限公司 是一家专注于分子生物学、细胞生物学、细菌学、遗传学、免疫学、生物化学、蛋白质学、细胞治疗、临床应用等领域，以销售为主的生物技术公司。销售的产品涉及，细胞株和菌株、胎牛血清、生化试剂、ELISA试剂盒、抗体和抗原、细胞因子、技术服务、实验耗材和消耗品、仪器设备等。客户遍布大学、研究所、医院、卫生防疫、商品检验检疫、制药公司、生物技术公司和食品工业等单位。公司与国内外生物试剂供应商保持着密切的合作关系，有着非常好的货源渠道， 可以在为用户提供前沿和完备的产品和物流服务。
公司的目标成为中国生命科学和生物技术等领域坚强的后盾，为这些领域的发展提供服务。以“质量是企业的生命，诚信是经营的资本”为警醒 ,严把所售出商品的质量关,不做任何有损顾客利益的事情。
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公司突出创新思维，提高工作效能，减低运作成本，为客户提供优惠的价格。
公司的经营理念：发展依靠人、发展适应人，发展为了人、发展培养人
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详细信息
一氧化氮（Nitric oxide，NO）含量测定试剂盒
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
NO（Nitric Oxide，NO）广泛分布于生物体内神经、循环、呼吸、消化、泌尿生殖等系统中，特别是神经组织中较丰富。它作为细胞间及细胞内的信息物质，发挥信号传递的作用，是一种新型的生物信使分子，在机体的生理、病理过程中起着重要的作用。
测定原理：
NO在体内或水溶液中极易氧化生成NO2—，在酸性条件下，NO2—与重氮盐磺酸胺生成重氮化合物，进一步与萘基乙烯基二胺偶合，产物在550nm处有特征吸收峰，测定其吸光值，可以计算NO含量。
自备实验用品及仪器：
天平、研钵或匀浆器、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。
试剂组成和配制：
提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体6mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂二：液体6mL×1瓶，4℃避光保存。(用之前60℃加热震荡15min)
样品处理：
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆。10000g，4℃离心15min，取上清，置冰上待测。
细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后10000g，4℃，离心15min，取上清置于冰上待测。
体液和培养液等其它液态样品：直接测定。
测定步骤和操作表：
分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至550nm。
操作表
空白管 | 测定管 | |
样品（μL） | 100 | |
提取液（μL） | 100 | |
试剂一（μL） | 50 | 50 |
试剂二（μL） | 50 | 50 |
混匀，室温静置15min，于微量石英比色皿/96孔板，测定A550，ΔA=A测定-A空白 | ||
NO含量计算：
用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线回归方程为：y= 0.016x -0.0103，R2= 0. 9986
1、组织样品：
（1）按样本质量计算
NO含量（μmoL/g 鲜重）=（ΔA +0.0103）÷0.016×V反总÷（V样÷V样总×W）×10-3
= 0.125×（ΔA +0.0103）÷W
（2）按样本蛋白浓度计算
NO含量（μmoL/mg prot）=（ΔA +0.0103）÷0.016×V反总÷（V样×Cpr）×10-3
= 0.125×（ΔA +0.0103）÷Cpr
2、细胞：
NO含量（μmol/104 cell）=（ΔA +0.0103）÷0.016×V反总÷（V样÷V样总×细胞数量）×10-3
= 0.125×（ΔA +0.0103）÷细胞数量（万个）
3、其他样品：
NO含量（μmoL/L）=（ΔA +0.0103）÷0.016×V反总÷V样
= 125×（ΔA +0.0103）
V反总：反应总体积，0.2mL；V样：反应中样品体积，0.1mL；V样总：加入提取液体积，1mL；W：样品质量，g；Cpr：蛋白浓度，mg/mL
用96孔板测定的计算公式如下
标准曲线回归方程为：y= 0.008x - 0.0103，R2= 0. 9986
1、组织样品：
（1）按样本重量计算
NO含量（μmoL/g 鲜重）=（ΔA +0.0103）÷0.008×V反总÷（V样÷V样总×W）×10-3
= 0.25×（ΔA +0.0103）÷W
（2）按样本蛋白浓度计算
NO含量（μmoL/mg prot）=（ΔA +0.0103）÷0.008×V反总÷（V样×Cpr）×10-3
= 0.25×（ΔA +0.0103）÷ Cpr
2、细胞：
NO含量（μmol/104 cell）=（ΔA +0.0103）÷0.008×V反总÷（V样÷V样总×细胞数量）×10-3
= 0.25×（ΔA +0.0103）÷细胞数量（万个）
其他样品：
NO含量（μmoL/L）=（ΔA +0.0103）÷0.008× V反总÷V样= 250×（ΔA +0.0103）
V反总：反应总体积，0.2mL；V样：反应中样品体积，0.1mL；V样总：加入提取液体积，1mL；W：样品质量，g；Cpr：蛋白浓度，mg/mL
上海牧荣生物科技有限公司
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提供加急物流处理，进口货物，最快交期1-2周。
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一氧化氮（Nitric oxide，NO）含量测定试剂盒
