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CCK8/细胞增殖检测

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上海晨晔生物科技有限公司

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上海晨晔生物科技有限公司位于临港浦江科技园,公司拥有完备的实验平台,致力于细胞,分子,蛋白等多方面,多领域的研究和应用。

公司团队人员均为本科学历以上,已经参与过大量医学课题研究,文献发表数十篇,能为客户提供专业,高效,完善的实验服务。

 

详细信息

    • CCK8/细胞增殖检测

    1. 绘制标准曲线

    收集培养可传代的细胞,确定细胞密度,然后接种细胞;
    按比例(如1:2的比例)依次用培养基等比梯度稀释细胞,一般做5 - 7个细胞数梯度,每组3 - 6个重复,接种至96孔板中,每孔加入100 ul 的细胞悬液;
    每孔加入10 ul CCK-8 Solution,轻轻混匀,在37℃细胞培养箱中孵育一定时间(依不同的细胞种类而定,一般是1 - 4 h)。酶标仪 测定450 nm处的吸光值,以细胞数为横坐标,吸光值为纵坐标绘制标准曲线。根据此标准曲线可测定未知样品的细胞数量。使用此 标准曲线的前提是试验条件与此一致。
    1. 细胞活性检测

    接种细胞于96孔板中(100 ul/孔,避免气泡产生)预培养24 h,同时设置空白组和对照组;
    向每孔加入10 ul CCK-8 Solution(建议沿细胞板壁加入,轻晃,避免气泡产生);
    在细胞培养箱中孵育一定时间;
    酶标仪测定450 nm处的吸光值。
    1. 细胞增殖—毒性检测

    接种细胞于96孔板中(100 ul/孔,避免气泡产生)预培养24 h,同时设置空白组和对照组;
    每孔分别加入不同浓度的待测药物,在培养箱中孵育一段时间(依据待测药物而定);
    向每孔加入10 ul CCK-8 Solution(建议沿细胞板壁加入,轻晃,避免气泡产生),培养箱中孵育一定时间;
    酶标仪测定450 nm处的吸光值。
    1. 换算公式

    细胞存活百分比=[(A-C)/(B-C)] x100
     抑制百分比=[(B-A)/(B-C)] x 100
    A:实验组吸光值(为含有培养基、细胞、待测药物和CCK-8 Solution的吸光值)
    B:对照组吸光值(为含有培养基、细胞、CCK-8 Solution的吸光值)
    C:空白组吸光值(为含有培养基、CCK-8 Solution的吸光值)客户提供
    • 客户提供

    需要检测的细胞、需要检测的药物
    • CCK8/细胞增殖检测实验结果提供

    1. 原始数据、作图曲线、实验报告。


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