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抗体去除液(Western)

型号
上海贝博生物科技有限公司

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生产厂家

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详细信息

保存温度
2-8℃
注意事项
试剂拆封后请尽快使用完!
有效期
一年
使用注意事项
1、有许多因素影响抗体从膜洗脱,如膜类型、抗体类型和浓度及其与抗原结合特性。因此需要优化抗体去除液中孵育膜的时间。
2、确定膜上抗体是否去除与优化抗体去除液孵育膜的时间:用ECL工作液孵育再生后的膜约1分钟,然后进行X 光胶片曝光并显影,可确定膜上的抗体是否去除。如胶片上显示条带,表明抗体未去除,应继续将膜浸泡在抗体去除液中另外孵育30-60 分钟。然后再次ECL 检查膜上抗体是否去除。重复此步骤直到抗体去除并确定孵育时间。
3、使用脱脂奶粉封闭的膜要比使用BSA 封闭的膜上的抗体更容易被去除下来。因此准备进行再生的膜,应该使用脱脂奶粉而不是BSA 封闭。
4、尽量避免使用干燥保存的膜,干的膜上的抗体很难被去除干净。
5、PVDF 膜上使用的效果好于硝酸纤维素膜。
6、使用非化学发光试剂进行的Western检测,例如DAB,NBT/BCIP,不适用于本试剂。
使用方法
1、将膜充分浸泡于适当体积的抗体去除液中,室温孵育15-30 分钟并不时晃动。孵育时间的长短应根据实验条件进行优化。洗脱某些抗体需要较长的时间如30-60 分钟。
2、用镊子取出膜,用自备Western Blot 洗涤缓冲液快速淋洗膜一次,然后用TBST洗膜3次,每次10分钟。
3、此时膜上抗体已去除膜已经再生。用脱脂奶粉或BSA 封闭一小时,进行下一轮Western Blot 实验。

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