TOV-112D 人上皮性卵巢癌细胞

苏州千舍生物实验室所出售细胞，均含有STR鉴定报告，保证细胞最佳状态发货~~

规格： 1*10 6   

该细胞系于 1992 年 10 月从一名42岁女性患有早发性卵巢癌的患者中启动。该患者为法裔加拿大血统，卵巢癌家族史不明。与 TOV-21G ( ATCC CRL-11730 ) 和 OV-90 ( ATCC CRL-11732 ) 不同，TOV-112D 细胞系在染色体 3p24 处没有缺失。

细胞特性

1） 来源：42岁 女性 卵巢癌组织

2） 形态：上皮样   贴壁生长

3） 含量：>1x10^6  细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5）用途：仅供科研使用。

运输和保存

干冰运输及复苏好存活细胞

（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

细胞接收后的处理

1）收到细胞后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。

2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。

3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的wan全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。

4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的wan全培养基来培养细胞。  收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1：2传代 。                      

一．培养基及培养冻存条件准备：

1） 准备基础培养基是 1:1 的 MCDB 105 培养基（含最终浓度为 1.5 g/L 碳酸qing钠）和M199 培养基（含最终浓度为 2.2 g/L 碳酸qing钠）的混合物，优质胎牛血清，15%；双抗，1%。

备注：该细胞生长缓慢，培养周期在3-4周左右。

2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

二． 细胞处理：

1） 冻存细胞的复苏：

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mLwan全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，wan全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8mlwan全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）胰dan白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。

3. 轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的wan全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

3）细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

下面T25瓶为例；

1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.

2. 1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ，按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。

3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

细胞培养的原则

无菌原则

1.操作台环境无菌：紫外线消毒至少30分钟，75%酒精擦拭。

2.实验材料无菌：紫外线照射、酒精擦拭、酒精灯、封口膜。

3.实验时手部无菌。

4.实验操作无菌。

减少细胞环境扰动原则

1.培养箱内温度恒定，进行操作前培养基预热。

2.转移细胞时需轻拿轻放、避免震动。

3.缩短细胞在培养箱外的时间，维持恒定的CO2浓度。

4. 枪头吹打时要轻柔，避免细胞发生破坏。

TOV-112D 人上皮性卵巢癌细胞

小鼠脑神经瘤细胞荧光素酶标记 neuro-2a+luc

小鼠胰腺癌细胞荧光素酶标记 panc02+LUC

小鼠单核巨噬细胞白血病细胞+GFP RAW 264.7+GFP

小鼠前列腺癌细胞荧光素酶标记 RM-1+LUC

大鼠脑胶质瘤细胞绿色荧光标记 C6+LUC

大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞低分化+GFP PC12低分化+GFP

中国仓鼠卵巢细胞k1 亚克隆系 CHO-K1（悬浮）

鸭胚胎成纤维细胞 Duck embryo

人胆囊上皮细胞永生化

人胰腺癌相关成纤维细胞永生化

人胰腺癌细胞永生化

人胆囊上皮细胞永生化+GFP GFP

C57小鼠巨噬细胞永生化

猪扁桃体上皮细胞永生化

人风湿性关节滑膜成纤维细胞永生化

猪脂肪干细胞永生化

鸭胚肝间质细胞永生化

羊睾丸间质细胞永生化

兔肝间质细胞永生化

人颈静脉球瘤细胞永生化

人主动脉内皮细胞永生化

山羊乳腺上皮细胞永生化

猪骨骼肌卫星细胞永生化

人肝窦内皮细胞永生化

人副神经节瘤细胞永生化

人肠息肉上皮细胞永生化

人原代听神经瘤细胞永生化

人原代髓核细胞永生化

人原代神经鞘膜瘤细胞永生化

人胰腺肿瘤成纤维细胞永生化

人子宫内膜上皮细胞永生化

大鼠脑微血管内皮细胞永生化

小鼠肺成纤维细胞永生化

小鼠胰腺星状细胞永生化

鸭脑微血管内皮细胞永生化

湖羊瘤胃上皮细胞永生化

猪肝星状细胞永生化

兔肝脏间质细胞永生化

猪鼻腔粘膜上皮细胞永生化

小鼠肾小球系膜细胞永生化

小鼠脂肪干细胞永生化

猪子宫内膜上皮细胞永生化

人前庭鞘膜瘤细胞永生化

人胰腺神经内分泌肿瘤细胞永生化

小鼠附睾脂肪干细胞永生化

小鼠骨髓巨噬细胞永生化

鸡胚成纤维细胞永生化

猪主动脉内皮细胞永生化

猪小肠上皮细胞永生化

雪貂鼻腔粘膜上皮细胞永生化

人淋巴管内皮细胞永生化

人主动脉瓣膜间质细胞永生化

人睾丸支持细胞永生化

人骨骼肌细胞永生化

人卵巢癌相关成纤维细胞永生化

人甲状旁腺细胞永生化

人乳腺上皮细胞永生化

人乳腺癌成纤维细胞永生化

人软骨细胞永生化

小鼠角膜上皮细胞永生化

小鼠肝星状细胞永生化

大鼠内皮祖细胞永生化

鸡气管黏膜上皮细胞永生化

大鼠毛囊干细胞永生化细胞

人成骨细胞永生化

人雪旺细胞永生化

人脂肪干细胞永生化

大鼠海绵体内皮细胞永生化

鸡骨骼肌细胞永生化

小鼠结肠黏膜上皮细胞永生化

猪皮肤成纤维细胞永生化

小鼠肺动脉平滑肌细胞永生化

小鼠卵巢颗粒细胞永生化

小鼠骨髓间充质干细胞永生化

小鼠骨髓间充质干细胞永生化+GFP GFP

小鼠内皮祖细胞永生化

小鼠角膜基质细胞永生化

小鼠肠间质细胞永生化

人支气管平滑肌细胞永生化

猫主动脉内皮细胞永生化

鸡肾小管上皮细胞永生化

大鼠乳腺成纤维细胞永生化