细胞凋亡是细胞的基本特征之一，它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定和一些疾病发生过程等方面起着十分重要的作用。在正常细胞中，PS只分布在细胞膜脂质双层的内侧，而在细胞凋亡早期，细胞膜中的PS由脂膜内侧翻向外侧。在体内，巨噬细胞可以识别翻转到细胞膜表面的PS 从而将这些程序性死亡的细胞清除，因此凋亡过程中并不伴随局部的炎症反应，而在细胞坏死的过程中则常常伴随着炎症反应。

AnnexinⅤ是一种分子量为35-36kD的Ca²⁺依赖性磷脂结合蛋白，能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的PS高亲和力特异性结合。PS 外翻发生在细胞核破裂，DNA 片段化以及凋亡相关蛋白出现之前，这使得Annexin V 与PS 的结合成为凋亡早期的一种重要检测标志事件。

检测原理：

用标记了FITC的AnnexinⅤ作为荧光探针，利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。细胞坏死的过程中也会发生细胞膜损伤，坏死的细胞会结合Annexin V-FITC。正常细胞和早期凋亡细胞的细胞膜是完整的，Propidium iodide（PI）是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞膜，但在凋亡中晚期的细胞和坏死细胞，PI能够透过细胞膜与细胞核结合呈现红色。将AnnexinⅤ与PI匹配使用，可以将凋亡早期的细胞和晚期的细胞以及死细胞区分开来。坏死细胞可以同时与Annexin V-FITC 和PI 结合显色，而PI 则被排除在活细胞（FITC 阴性）和早期凋亡细胞（FITC 阳性）之外。在没有巨噬细胞的情况下，凋亡的最后阶段会像细胞坏死一样发生整个细胞的解体，从而使凋亡晚期的细胞也同时被FITC 和PI 结合染色呈现双阳性。

贝博Annexin V-FITC / PI 细胞凋亡检测试剂盒可以方便快捷的检测凋亡细胞，使用流式细胞仪、荧光显微镜或其它荧光检测设备进行检测。

   产品特点：

● 方便：可用流式细胞仪或荧光显微镜检测；

● 快速：1小时内即可完成实验；

● 准确：能准确区分活细胞、凋亡细胞和坏死细胞，并计数各群细胞的比例。

   检测方法：

流式细胞仪或荧光显微镜

   Annexin V-FITC / PI 细胞凋亡检测试剂盒样本类型：

● 悬浮细胞       ● 贴壁细胞

样品染色：

1、  离心收集悬浮细胞。离心机300-500g，2-8°C，离心时间5min，弃培养基。

2、  用冷PBS洗涤细胞两次。（300g，2-8°C，离心时间5min收集细胞）。

3、  用400ul 1X Annexin V结合液悬浮细胞，浓度大约为1 X 10⁶ cells/ml。

4、  在细胞悬浮液中加入5ul Annexin V-FITC染色液，轻轻混匀后于2-8°C避光条件下孵育15分钟。

5、  加入5-10ul PI染色液后轻轻混匀于2-8°C避光条件下孵育5分钟。

6、  立即用流式细胞仪或荧光显微镜检测。

流式细胞仪分析：

经处理过的细胞此时可以在流式细胞仪上分析。激发波长为488nm。

按照常规的流式凋亡检测的操作即可。

Annexin V-FITC的绿色荧光发射波长530nm，信号可以通过FL1（FITC接收器）通道检测；PI红色荧光在620nm，通过FL2（Propidium iodide接收器）通道或FL3通道检测。

BB-41033 Annexin V-APC / PI 细胞凋亡检测试剂盒

BB-410332 Annexin V-APC / NucGreen 细胞凋亡检测试剂盒

BB-41034 Annexin V-APC / 7-AAD 细胞凋亡检测试剂盒

BB-41035 Annexin V Alexa Fluor 647 / PI 细胞凋亡检测试剂盒

BB-41036 Annexin V Alexa Fluor 647 / 7-AAD 细胞凋亡检测试剂盒

BB-410362 Annexin V Alexa Fluor 647 / NucGreen 细胞凋亡检测试剂盒

BB-41037 Annexin V Alexa Fluor 660 / PI 细胞凋亡检测试剂盒

BB-41038 Annexin V Alexa Fluor 660 / 7-AAD 细胞凋亡检测试剂盒

BB-410382 Annexin V Alexa Fluor 660 / NucGreen 细胞凋亡检测试剂盒

BB-41039 Annexin V-PE-Cyanine5 细胞凋亡检测试剂盒

BB-4104   细胞周期检测试剂盒（PI）

BB-41043 细胞周期检测试剂盒

BB-41044 细胞周期检测试剂盒