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556547 BD AnnexinV-FITC细胞凋亡检测试剂盒
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BD 556547 AnnexinV-FITC细胞凋亡检测试剂盒
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BD AnnexinV-FITC细胞凋亡检测试剂盒-常备现货
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BD 556547 AnnexinV-FITC细胞凋亡检测试剂盒 100T/盒,产品简介:
产品品牌:BD
产品货号:556547
产品名称: AnnexinV-FITC细胞凋亡检测试剂盒
产品规格:100T/盒
BD AnnexinV-FITC细胞凋亡检测试剂盒-常备现货
BD 556547 AnnexinV-FITC细胞凋亡检测试剂盒 100T/盒,产品说明:
概述
在正常细胞中,磷脂酰丝an酸只分布在细胞膜脂质双层的内侧,细胞发生凋亡最早期,膜磷脂酰丝an酸(PS) 由脂膜内侧翻向外侧,这一变化早于细胞皱缩、染色质浓缩、DN*断化和细胞膜的通透性增加等凋亡现象,Annexinv是一种磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝an酸有高度亲和力,故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝an酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexinv被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。碘化丙啶(Propidium lodide.PI) 是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但凋亡中晚期的细胞和死细胞由于细胞膜通透性的增加,Pl能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将Annexin V与PI匹配使用,就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。
BD 556547 AnnexinV-FITC/PI细胞周亡双染试剂盒的操作步骤:
贴壁细胞需用0.25%的yi酶消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2%的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的yi酶消化时,注意必须 che di 清除EDTA: 在标记前用1XPBS或1xbindingbufer洗涤,清除EDTA,以免残余的EDTA与Ca2+整合,影响Annexin V的结合。
(1) 用去离子水将10xBinding Buffer稀释成1xBinding Buffer;
(2)细胞收集。悬浮细胞收集: 离心5分钟,贴壁细胞:用不含EDTA的yi酶消化收集后(注: yi酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞膜上磷脂酰丝an酸与Annexin V-FITC的结合),于室温2000rpm离心5~ 10分钟,收集细胞
(3) 细胞洗涤: 用预冷1XPBS (4OC) 重悬细胞一次,2000rpm离心5 ~ 10分钟,洗涤细胞
(4)加入300uL的1xBinding Buffer 悬浮细胞:
(5) Annexin V-FITC标记: 加入5uL的Annexin VFITC混匀后,避光,室温孵育15分钟:
(6) PI标记:上机前5分钟再加入5uL的PI染色
(7) 上机前,补加200L的1xBinding Buffer.
BD 556547 AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡双染试剂盒的保存
4°C保存,两个月内可保持稳定; 避免反复冻融。
BD 556547 AnnexinV-FITC/PI细胞周亡双染试剂盒的注意事项:
(1)本试剂只适用于实验,不适用于临床检测
(2) PI (propidium iodide,碘化**)有毒性,能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用,使用时需戴手套
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。在处理和标记时,尽可能在暗处进行。在孵育阶段,用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后,在暗室内用显微镜观察
(4)整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作,以免影响细胞状态
(5)在细胞洗涤的未尾一步,请尽量将上清弃净,以免PBS残留,有可能会影响实验结果
(6) 为防止荧光衰变,宜在1小时内进行流式检测
(7) PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,建议首先进行Annexin VFITC染色,最短可在上机前5分钟再加入PI染色。
产品订购信息:
556547 AnnexinV-FITC细胞凋亡检测试剂盒 100T/盒