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6013 TAKARA pMD 19-T载体克隆试剂盒 现货
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产品名称:TAKARA 载体克隆试剂盒 pMD 19-T 载体
产品货号:6013
产品品牌:takara宝日医
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产品信息:
· 品牌: Takara
· 货号: 6013
· 规格: 20 反应
pMD 19-T Vector是一种高效克隆PCR产物 (TA Cloning) 的专用载体。本载体由pUC19载体改建而成,在pUC19载体的多克隆位点处的Xba I 和Sal I 识别位点之间插入了EcoR V 识别位点,用EcoR V 进行酶切反应后,再在两侧的3′端添加 “T" 而成。因大部分耐热性DNA聚合酶进行PCR反应时都有在PCR 产物的3′末端添加一个 “A" 的特性,所以使用本制品可以大大提高PCR产物的连接、克隆效率。
由于本载体以pUC19载体为基础构建而成,所以它具有同pUC19载体相同的功能。此外,本制品中的高效连接液Solution I 可以在短时间内 (约30分钟) 完成连接反应,其连接液可以直接用于细菌转化,大大方便了实验操作。本制品中的Control Insert (500 bp) 还可以用于Control反应。
本载体与pMD 18-T Vector 相比,本制品的β-半乳糖苷酶的表达活性更高,菌落显示蓝色的时间缩短,菌落显示的蓝色更深。因此,克隆后更容易进行克隆体的蓝白筛选。
用途 |
1. 进行TA克隆,克隆PCR产物。 2. 对克隆后的PCR产物使用BcaBEST Sequencing Primers、M13 Primers进行DNA测序。 |
产品名称:克隆用T载体pMD™19-T Vector Cloning Kit
产品货号:6013
产品品牌:takara宝日医
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特性 (Features) | 优势 (Advantages) | 利益 (Benefits) |
预切线性化pMD19-T载体 | 准备工作少,直接用于克隆反应 | 节省实验时间,提高效率 |
含有T7和SP6启动子 | 方便后续体外转录和测序 | 适用于多种下游应用,包括蛋白表达和RNA合成 |
高效TA克隆系统 | 提高PCR产物的克隆效率 | 提高成功率,减少重做实验的需要 |
简单快速的操作流程 | 用户友好,适合新手和有经验的研究人员 | 提高实验室工作效率和产出 |
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1. Solution I 请于冰中融解。
2. 克隆时使用的Insert DNA片段 (PCR产物) 建议进行切胶回收纯化,否则PCR产物中的短片段DNA (甚至是电泳也无法确认的非特异性小片段)、残存引物等杂质都会影响TA克隆效率。
3. 按照本实验操作进行连接后,直接进行转化时的连接液不要超过20 μl。当要转化的DNA量较大或准备进行电转化时,需对连接液进行乙醇沉淀,纯化DNA后再进行转化。进行乙醇沉淀时使用Dr. GenTLE Precipitation Carrier (Code No.: 9094) 可以提高DNA的回收率。
4. 连接反应请在25℃以下进行,温度升高 (>26℃) 较难形成环状DNA。连接效率偏低时,可适当延长连接反应时间至数小时。
5. 本制品来源于pUC19载体,因此,适合pUC19载体的感受态细胞都可以使用,如:JM109等。
pMD 19-T Vector的结构 |
5. 本制品来源于pUC19载体,因此,适合pUC19载体的感受态细胞都可以使用,如:JM109等。
产品名称:TAKARA 载体克隆试剂盒 pMD 19-T 载体
产品货号:6013
产品品牌:takara宝日医
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产品优势:
特性 (Features) | 优势 (Advantages) | |
预切线性化pMD19-T载体 | 准备工作少,直接用于克隆反应 | 节省实验时间,提高效率 |
含有T7和SP6启动子 | 方便后续体外转录和测序 | 适用于多种下游应用,包括蛋白表达和RNA合成 |
高效TA克隆系统 | 提高PCR产物的克隆效率 | 提高成功率,减少重做实验的需要 |
简单快速的操作流程 | 用户友好,适合新手和有经验的研究人员 | 提高实验室工作效率和产出 |