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小鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒
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此产品不用于医疗及临床,仅用于科研或动物实验!
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本试剂仅供研究使用 标本:血清或血浆及相关液体
ELISA试剂盒试验原理:
ELISA试剂盒是采用双抗夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA)方法。
ELISA试剂盒自备材料
1. 蒸馏水。
2. 加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3. 振荡器及磁力搅拌器等。
ELISA试剂盒安全性
1. 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
ELISA试剂盒操作注意事项
1. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀释过后的标准品应丢弃,不可保存。
2. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3. 不用的其它试剂,应包装好或盖好,不同批号的试剂不要混用,保质前使用。
4. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5. 使用干净的塑料容器配置洗涤液,使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7. 底物A易挥发,避免长时间打开盖子,底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒,实验完成后应立即读取OD值。
8. 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
ELISA试剂盒样品收集、处理及保存方法
1、 血 清-----操作过程中避免任何细胞刺激,使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、 血 浆----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测,1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液--1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 组织匀浆---将组织加入适量生理盐水捣碎,1000×g离心10分钟,取上清液。
5、 保 存----如果样品不立即使用,应将其分成小部分-80 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血,如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤,不要在37℃或更高的温度加热解冻,应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
ELISA试剂盒试剂的准备
1. 标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存,稀释前将标准品振荡混匀,稀释比例按说明书要求进行。
2. 洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。
ELISA试剂盒操作步骤
1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数,每个标准品和空白孔建议做复孔,每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生素标记的抗体,盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次,如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5. 每孔加入50ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次,如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。
ELISA试剂盒性能
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。
2.批内与批间应分别小于9%和11%
ELISA试剂盒保存条件及有效期:
1. 试剂盒保存:2-8℃
2. 有效期:6个月
3. 产品运输:专用冷藏包,优先顺丰快运,确保产品安全送达。
ELISA试剂盒48T/96T分别可以检测多少个样本?
96T检测85个样本,剩余 的11个孔为高低浓度标准孔加1个空白对照孔。
48T检测37个样本,剩余 的11个孔为高低浓度标准孔加1个空白对照孔。
ELISA试剂盒血清血浆样本该选用哪种真空采管收集?
血清:不含抗凝剂的采管/含促凝剂采管。(通常为红色、黄色、橘色管盖的采管
血浆:含抗凝剂采管。(通常为绿色、紫色管盖的采管 )
样品收集后若在1周内进行检测可保存于2-8℃,若不能及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃(1个月内检测),或-80℃(3个月内检测),避免反复冻融。在检测前,冷冻过的样本应缓慢地融化并离心除去冻融过程产生的沉淀物。
ELISA试剂盒代测寄样本有什么要求?
单纯血清血浆,可以用泡沫盒子加冰袋快递运输,若冻存的样本,用干冰运输更好。
ELISA试剂盒样本保存期限多久?
2-8℃≤1周; -20℃1周<t≤30天; -80℃>30天。
ELISA试剂盒实验设置复孔有什么好处?
实验设复孔个人认为有以下几个优点:
1.试验中的随机性比较大,设多个复孔可以去处部分偏差大的数据减少检测的误差;
2.设置多个复孔具有统计学意义,否则很难说明数据是偶然的还是真实的;
3.设置复孔可以避免由于主观因素造成的误差;
总的来说是为了,你得到的数据更接近与真实值,避免试验客观和主观误差。
慧嘉生物生产的试剂盒与其它厂家的优势在哪里?
慧嘉生物的试剂盒变异系数小,试剂盒稳定性更高,批间和批内重复性偏差CV值都会控制在7%以下;上万种ELISA试剂盒指标齐全,客户下单后交货迅速(大部分产品在一周以内交货);实验室提供免费代测服务,为您节省实验时间;公司有专门技术部门提供一对一的售后服务,为您的实验保驾护航;产品免费包邮,优先选择顺丰快运,保证货物安全送达。