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DN25-10MG Sigma脱氧核糖核酸酶
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- DN25-10MG
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详细信息
Sigma脱氧核糖核酸酶
一般描述
Sigma脱氧核糖核酸酶是一种从牛胰腺分离的核酸内切酶。
我们的DNase I可将双链和单链DNA酶解成寡核苷酸和单核苷酸。
牛胰腺DNase存在四种异构酶A, B, C和D，均具有不同的等电点：5.22, 4.96, 5.06及4.78.3。主要形式为A，其次为B和C，D所占的比例最小。
DNase I结构类似于核酸外切酶III。其中包括两个中央β折叠。每个β折叠由六个β-链组成。这种复杂的β折叠被大量环形和螺旋形区域包围。该酶结构类似于核酸外切酶III。[1]
应用
从原代细胞分离液中去除DNA，在降低粘度的同时提高产量：
将标记碱基掺入DNA：DNA缺口
放射性标记
生物工艺应用：DNA去除
在RT-PCR前从RNA制剂中去除基因组DNA
体外转录
缺口平移
DNase足迹
肌动蛋白调控胞内肌动蛋白聚合和细胞凋亡
蛋白质与核酸紫外线交联
DNase参与调控胞内肌动蛋白聚合，同时参与细胞凋亡过程 [1]
用于从蛋白质样品中除去 DNA。
生化/生理作用
Sigma脱氧核糖核酸酶是一种内切核酸酶，可作用于与嘧啶相邻的磷酸二酯键以产生具有末端5′-磷酸的聚核苷酸。当Mg2+存在时，DNAse I可独立切割DNA的每条链且切割位点是随机的。当Mn2+存在时，两条DNA链都几乎是在同样的位置被切割。二价阳离子如Mn2+, Ca2+, Co2+以及Zn2+都是酶的激活剂。5 mM浓度的Ca2+可稳定酶免收蛋白水解酶的消化。最适pH在7-8之间。来自牛胰腺的DNAse I由四种色谱可区分的组分A，B，C和D组成，它们的摩尔比分别为4:1:1。仅发现少量D。螯合剂、十二烷基硫酸钠（SDS）和肌动蛋白都已知可抑制酶的活性。
特点和优势
我们的脱氧核糖核酸酶DNAse I基本属于不含RNAse产品，支持该产品应用。
单位定义
一Kunitz单位的酶在以I型或III型DNA作为底物时，在 pH 5.0，37°C的条件下在每mL中每分钟可引起0.001的A260改变。
外形
粗制品，含有氯化钙
制备说明
溶液0.15 M NaCl的10 mg/mL DNAse I溶液分装保存在−20 °C一周后可能会丢失<10%的活性。同样的溶液保存在2-8 °C则可能丢失约20%的活性。当在pH 5和7之间时，它可在60 °C维持活性最长达五小时，并在68 °C <10分钟内丢失活性。它在乙酸缓冲液（pH 5.0）和tris缓冲液((pH 7.2)，1 mg/mL浓度)中以6%/小时的速率丢失活性。
分析说明
通过缩二脲法测定的蛋白质。
