产品简介
本公司生产的大肠杆菌 DB3.1 细胞含有 gyrA462 基因,对 λ 噬菌体的 ccdB 基因产物的毒性具有抵
抗作用,特别适用于转化和扩增包含 ccdB 基因的质粒载体。使用 pUC18 质粒检测,转化效率可达
107 cfu/μg DNA.,-80 ℃ 保存几个月转化效率不发生改变。每支感受态可以酌情分装使用,降低
了实验的成本。质量稳定,使用方便,质优价廉。
产品组成
组分
DB3.1 感受态细胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F- gyrA462 endA1 Δ(sr1-recA) mcrB mrr hsdS20(rB-, mB-) supE44ara-14 galK2 lacY1 proA2
rpsL20(SmR) xyl-5 λ- leu mtl1
存储条件
-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
产品特性
- DB3.1 感受态细胞具有链m素抗性
质量控制
无外源质粒 DNA 残留;
化学法转化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;
2. 将待转化 DNA 加入到 100μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30min;
3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰水浴中静置 2-3 min;
4. 向离心管中加入 900μL LB 或 SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min;
5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用;
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10;
3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;
4. 为确保优良转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。