灵活的规格，只需更少的一抗用量，重复性更好的结果

Invitrogen™ iBind™ Flex蛋白质免疫印迹处理系统采用灵活的印迹处理方法，可助您显著缩短操作时间，检测不同规格的印迹膜，并轻松优化抗体用量。该系统利用 顺序侧流技术, （毛细管作用的一种简单形式），可自动化完成Western Blot实验中所有的抗体孵育和洗涤步骤，您只需将一抗、二抗溶液和洗涤缓冲液加入到设备中，设备即可自动进行相关操作。在3小时内，就能得到可立即用于最终检测的印迹膜。iBind Flex蛋白质免疫印迹处理系统在带来灵活的解决方案的同时，也兼顾了自动化的便捷性。

• 灵活性—可处理1张中型印迹膜、2张微型印迹膜或6张垂直剪切膜条，并可在一次实验的不同膜上采用不同的抗体
• 兼容性—可使用硝酸纤维素膜或PVDF膜，可用直接标记的一抗或二抗进行检测（AP、HRP或荧光标记）
• 节约成本—用于蛋白质免疫印迹时，比传统孵育方式最多可节省80%的一抗

只需更少的一抗，就能获得更好的蛋白质免疫印迹结果。对比手动处理（在孵育盒中进行孵育和洗涤步骤）和Invitrogen™ iBind™ Flex系统处理的蛋白质免疫印迹。使用Bolt™ 4-12%、10孔凝胶和MES SDS电泳缓冲液分离样本，随后，使用iBlot™ 2干转系统转印至硝酸纤维素膜上。每块凝胶具有10个泳道，样本为2倍梯度稀释的293细胞提取物（30 µg-0.06 µg）。使用下述条件进行抗体孵育和洗涤后，将印迹膜浸在Thermo Scientific™ SuperSignal™ West Dura底物中孵育5分钟，并使用成像系统显色。

• MEK2 (45 kDa)——兔抗MEK2抗体，按1:1000 稀释（用于iBind系统：将2µL抗体溶于2mL iBind溶液中，用于手动孵育盒操作时，将10µL抗体溶于10mL 缓冲液中）。
• Securin(428 kDa)——兔抗Securin抗体，按1:1000 稀释（用于iBind系统：将2µL抗体溶于2mL iBind溶液中，用于手动孵育盒操作时，将10µL抗体溶于10mL 缓冲液中）。
• 二抗：山羊抗兔IgG，使用iBind系统，按1:600稀释（3.33 µL抗体溶于2mL iBind溶液中），用于手动孵育盒操作时，按1:1800稀释（将5.55 µL抗体溶于10mL iBind溶液中）。

使用垂直剪切膜条和荧光检测都获得了出众的蛋白质免疫印迹结果。 对比手动处理（在孵育盒中进行孵育和洗涤步骤）和Invitrogen™ iBind™ Flex蛋白质免疫印迹处理系统处理的印迹膜。使用Bolt™ 4-12%、10孔凝胶和MES SDS电泳缓冲液分离样本，随后，使用iBlot™ 2干转系统转印至硝酸纤维素膜上，将每张印迹膜剪切成3泳道膜条。最后，使用成像仪进行成像。

样本和泳道如下所示：

• 泳道 1:  Thermo Scientific™ PageRuler™预染NIR蛋白分子量标记(3 µL)
• 膜条 1:  磷酸化Akt提取物（15 µg、7.5 µg、3.75 µg）和Elk-1融合蛋白（150 ng、75 ng、37.5 ng）
• 膜条 2:  HeLa细胞提取物（30 µg、15 µg、7.5 µg）
• 膜条 3:  磷酸化Akt提取物（15 µg、7.5 µg、3.75 µg）
• 膜条 4:  Elk-1融合蛋白（150 ng、75 ng、37.5 ng）
• 膜条 5:  HeLa细胞提取物（30 µg、15 µg、7.5 µg）
• 膜条 6:  HeLa细胞提取物（30 µg、15 µg、7.5 µg）