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CLO01-20KU NobleRyder DNA连接酶
- 型号
- CLO01-20KU
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北京诺博莱德科技有限公司位于北京市海淀区，是一家专业从事生化试剂、分子生物学试剂、实验耗材及实验仪器研发、销售、服务为一体的生物科技公司，公司主要经营的进口品牌包括 Qiagen, Omega, Sigma, Invitrogen, Roche, Abcam, Santa cruz, Fermantas（MBI）, NEB, BD, Peprotech, Abnova, R&D systerms, GE, Biovision, Millipore, Amresco, Merck, CST, Axygen, Corning, NUNC, Thermo fihser, Eppendorf 等；产品涉及化工原料、生化试剂、分子克隆相关试剂、细胞培养及检测常用试剂、实验室常用耗材及仪器设备等。
诺博莱德 Noble-Ryder秉承博采众长、诚信为本、德行天下的宗旨服务于客户。公司合作单位及客户包括各大医院、科研机构、大专院校、制药单位、医学检验单位、卫生防疫、生物技术公司、食品单位等诸多领域，正逐步成长为优秀的生化试剂和耗材供应商。
详细信息
NobleRyder CLO01-20KU DNA连接酶 T4 DNA ligase（Rapid） 20KU
产品品牌：NobleRyder
产品货号：CLO01-20KU
产品名称：DNA连接酶
英文名称：T4 DNA ligase（Rapid）
产品规格：20KU
NobleRyder DNA连接酶
产品内容：
组分 | CLO01-20KU | CLO01-80KU |
T4 DNA Ligase (400U/μL) | 50 μL | 200 μL |
10 x T4 DNA Ligase Buffer | 100 μL | 0.5 mL |
5 x Rapid Ligase Buffer | 200 μL | 1 mL |
产品简介
T4 DNA Ligase是从表达T4 DNA连接酶基因的大肠杆菌中纯化而来，可催化双链DNA或RNA上的5'-磷酸末端和3'-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化粘性末端或平末端之间的连接，还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA 杂交双链中的单链切口。
活性定义
在20μL的连接反应体系中，6μg的λDNA-HindⅢ分解物在16℃下反应30 min时，催化50%以上的DNA片段发生连接所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。
注意事项
1. 请于使用前确保产品wan全解冻，che底混匀后短暂离心，置于冰上备用。
2. T4 DNA Ligase 不稳定，使用时冰上操作，用完立即放回-20℃。
3. 反复冻融会影响产品的性能。
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
实验方法
1.DNA片段与载体连接（粘性末端连接）
①冰上配制连接反应体系：
试剂 | 体积 |
线性化载体DNA | 20~100 ng |
插入片段DNA | 3:1~10:1（片段：载体摩尔比） |
10 x T4 DNA Ligase Buffer | 1 μL |
T4 DNA Ligase (400U/μL) | 1 μL |
DNase-Free Water | Up to 10 μL |
②反应条件：
25 ℃反应10 min。
2.DNA片段与载体连接（平末端连接）
①冰上配制连接反应体系：
试剂 | 体积 |
线性化载体DNA | 20~100 ng |
插入片段DNA | 1:1~5:1（片段：载体摩尔比） |
5 x Rapid Ligase Buffer | 2 μL |
T4 DNA Ligase (400U/μL) | 2 μL |
DNase-Free Water | Up to 10 μL |
* 平末端载体与片段进行连接时，应首先将载体进行去磷酸化处理，防止其自身环化。
②反应条件：
25 ℃反应1 h或16 ℃过夜。
3. DNA 文库构建中接头连接反应
①冰上配制连接反应体系：T4 DNA Ligase (400U/μL)
试剂 | 体积 |
dA-tailed DNA | 10 μL |
DNA Adapter | 1:10~1:20（dA-tailed DNA : DNA Adapter 摩尔比） |
5 x Rapid Ligase Buffer | 4 μL |
T4 DNA Ligase(400U/μl) | 2 μL |
DNase-Free Water | Up to 20 μL |
②反应条件：
25 ℃反应10 min。
如需失活T4 DNA Ligase在 65℃反应10 min 或者 70℃反应 5 min。
产品订购信息：
NobleRyder CLO01-20KU DNA连接酶 T4 DNA ligase（Rapid） 20KU
NobleRyder CLO01-80KU DNA连接酶 T4 DNA ligase（Rapid） 80KU
NobleRyder DNA连接酶
