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DB212-Ch 鸡产气荚膜梭菌坏死性肠炎毒素B(NetB)
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- DB212-Ch
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上海沪鼎生物科技有限公司坐落于上海市松江临港科技城汉桥文化科技园，是一家集研发、生产、销售为一体的生物企业。公司具有完善的实验技术开发实验室，成熟的抗体研发系统，熟练掌握各种生物学技术，结合公司的研发团队，可以有效的保证公司产品强的稳定性和高的准确性，同时又具有竞争力的价格。公司目前可以提供多种生物学检测试剂盒、进口常规生化试剂、抗体、化学试剂、药典级试剂、标准品、血清等产品，覆盖分子生物学、生物化学、细胞生物学、免疫学、蛋白组学、生物制药与诊断试剂研发生产等生命科学的各个领域。公司以提供生命科学科研用检测试剂为主，致力于为各大高等院校、科研机构、诊断试剂生产厂家以及生物制药公司的广大客户们提供高质量生物产品。
上海沪鼎生物自主研发的ELISA试剂盒，现已涵盖20多个种属，数千种产品，涉及肿瘤、激素、自身免疫、心血管、代谢等十多个研究领域。
公司与众多国内外大学、重点实验室、科研院所、企事业单位有着长期的良好合作。且在合作过程中，公司所表现出的专业、务实和坦诚态度，获得了合作者的赞誉。
上海沪鼎生物人特别感谢以下合作单位多年以来的支持与信任！
部分合作单位
详细信息
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡产气荚膜梭菌坏死性肠炎毒素B(NetB)水平。用纯化的鸡产气荚膜梭菌坏死性肠炎毒素B(NetB)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入产气荚膜梭菌坏死性肠炎毒素B(NetB)，再与HRP标记的产气荚膜梭菌坏死性肠炎毒素B(NetB)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的产气荚膜梭菌坏死性肠炎毒素B(NetB)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鸡产气荚膜梭菌坏死性肠炎毒素B(NetB)浓度。
试剂盒组成
1 | 30倍浓缩洗涤液 | 20ml×1瓶 | 7 | 终止液 | 6ml×1瓶 |
2 | 酶标试剂 | 6ml×1瓶 | 8 | 标准品（240ng/L） | 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶标包被板 | 12孔×8条 | 9 | 标准品稀释液 | 1.5ml×1瓶 |
4 | 样品稀释液 | 6ml×1瓶 | 10 | 说明书 | 1份 |
5 | 显色剂A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2张 |
6 | 显色剂B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1个 |
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
120ng/L | 5号标准品 | 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 |
60ng/L | 4号标准品 | 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 |
30ng/L | 3号标准品 | 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 |
15ng/L | 2号标准品 | 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 |
7.5ng/L | 1号标准品 | 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 |
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
