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免疫共沉淀(CHIRP)实验
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生产厂家公司承接各种实验代做外包服务:石蜡包埋、免疫组化、HE染色、PAS染色、DNA提取、RNA提取、探针、SNP检测、WB、EMSA、CCK8检测、细胞凋亡、细胞周期检测、流式、质粒转染、ROS活性氧检测、线粒体膜电位检测、平板克隆、软琼脂克隆、细胞划痕、细胞粘附,并为广大科研用户提供各种高品质的高*_端化学试剂、生物学试剂、免疫学检测,ELISA试剂盒(免费代测)、生化试剂盒、分析标准品、对照品、标准物质、食品安全检测试剂、动物疫病类检测产品、兽药残留检测试剂、细胞培养服务等,应用覆盖药物分析领域、食品安全领域、聚合物研究领域、环境监测领域,客户广泛分布于食品、制药、第三方检测、环境测试机构、化工、科研院校、生物工程等行业。
主营:
1生化试剂、标准品对照品、标准物质、
2.ELISA试剂盒、分离液、分离液试剂盒
3.细胞:*细胞、国产肿瘤细胞、国产正常细胞、肿瘤耐药细胞
4.食品安全检测试剂、动物疫病类检测产品、兽药残留检测试剂
5.耗材:常用实验耗材、移液器
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法,是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。免疫共沉淀具有经翻译后修饰的,处于天然状态的优点。
免疫共沉淀(CHIRP)实验意义
IncRNA可与蛋白质、DNA和RNA相互作用,实现多样化功能,CHIRP可以探讨IncRNA与其互作的DNA.蛋白质的功能与作用机制,是相关科学研究工作的有力工具。IncRNA的研究在表观遗传调控等生命活动中发挥重要作用,CHIRP是研究
IncRNA的重要技术手段,可在全基因组范围内鉴定RNA与染色质的互作,并对其进行定性、定量及定位的分析。
免疫共沉淀(CHIRP)实验原理
CHIRP (Chromatin Isolation by RNA Purification)是通过结合生物素的核酸探针,将目标RNA拉下来,与之共同作用的DNA染色体片段(DNA与蛋白质复合体)就会被吸附下来,后可以通过qRT-PCR. WB.测序分析和质谱分析等检测RNA. DNA和蛋白质。
CHIRP的实验流程
①探针设计:设计反义穿核苷酸探针:
②细胞培养;
③破碎细胞:
④生物素标记的DNA探针与RNA杂交;
⑤CHIRP;
⑥RNA、DNA及核酸结合蛋白提取; .
⑦分析检测。,
结果展示
实验完成周期及交付标准
1.实验周期: 1-3个月
2.交付标准: CHIRP鉴定结果报告、分析报告、实验报告(试剂、 耗材、实验步骤)、原始数据等
实验需与客户确认的信息
1.目的基因与蛋白信息。
2.样本类型与种属
3.是否需要生信分析
注意的问题:
(1)细胞裂解采用温和的裂解条件,不能破坏细胞内存在的所有蛋白质-蛋白质相互作用,多采用非离子变性剂(NP40或Triton X-100)。每种细胞的裂解条件是不一样的,通过经验确定。不能用高浓度的变性剂(0.2%SDS),细胞裂解液中要加各种酶抑制剂,如商品化的cocktailer。
(2)使用明确的抗体,可以将几种抗体共同使用。
(3)使用对照抗体:
单克隆抗体:正常小鼠的IgG或另一类单抗
兔多克隆抗体:正常兔IgG
实验代做服务: