化药新药研发检测

苯二氮卓类(BZ)是精神活性药物，广泛用于治疗焦虑、失眠、烦躁、癫痫、肌肉痉挛和酒精戒断。BZ短期使用被认为是安全有效的。然而，频繁使用这些药物可能导致依赖和滥用。由于这一特性，临床、法医和毒理学实验室对监测生物样品中的这些化合物很感兴趣。生物样品常用的样品制备方法包括：先将蛋白质沉淀，然后是液-液萃取(LLE)或固相萃取(SPE)。本应用介绍了一种简便、快速、有效的全血苯二氮卓类药物定量分析方法。

用含0.4%甲酸(FA)的2ml乙腈(MeCN)提取1mL阴性全血。采用400mg硫酸镁(MgSO4)和100mg醋酸钠(NaOAc)(预装在15 ml离心管中)使相分离加强，并将苯二氮杂卓分离至有机相中。摇匀离心后，用含150mg MgSO4，50mg PSA， 50mg C18的2ml dSPE管纯化，取1 mL上清液。MgSO4可除去萃取物中残余的水，PSA和C18去除有机酸和脂肪基质共萃取物。得到一个纯净的提取物，用于LC-MS/MS分析。

建立苯二氮卓类化合物的基质匹配的校准曲线。10个基质匹配溶液浓度在10 ~ 500 ng/mL范围内均呈线性关系，R范围为0.9963 ~ 1.0000。通过比较同基质校准曲线与标准溶液的校准曲线的斜率来评价基质效应。基质效应很小，从-22%到18%不等。这表明带有dSPE清除的QuEChERS方法可以充分去除基质干扰，这些干扰可能导致离子的显著抑制或增强。加样回收率为85.5 ~ 105%，相对标准偏差(RSD%)为10.7%。该方法也应用于8份真实全血样本，未检出苯二氮卓类药物超过10 ng/mL的定量限。