美容品/化妆品检测

实验记录手册| 化妆品中甲醛的检测方法

美国食品药品管理局（FDA）调查结果显示，化妆品中使用甲醛的比例高达25%。4瓶化妆品有1瓶含有甲醛。

虽然化妆品和日常卫生用品中的甲醛常常可以经皮肤与人体接触，但很难进入到体内，对机体的作用局限于接触部位和其紧密接触的细胞层。但是，当接触的量超出正常代谢容量时，甲醛可进入到血液中，可能会对肾、肝和造血等组织发挥毒性作用，引起多个系统的损害。

因此，中国对化妆品等其他产品中甲醛的大使用含量有严格的标准。以化妆品为例，甲醛和多聚甲醛在化妆品中的大允许使用含量为0.2%（以游离甲醛计），并规定禁用于喷雾化妆品。

国家药品监督管理局新增的《化妆品中游离甲醛的检测方法》（2015版）中对甲醛的含量标准及检测做了详细的指导与规定，自2020年1月1日起，化妆品注册、备案及监督检验相关检测均需按照发布的检测方法进行。

奥豪斯根据国家修订的标准与实施细则，通过与实践结合，为大家总结了化妆品中甲醛的检测方法。

1 范围

本方法规定了采用柱前衍生化液相色谱-紫外检测法测定化妆品中甲醛（CAS ：50-00-0）的方法。

本方法适用于化妆品中甲醛含量的测定。

2 方法提要

甲醛测定采用柱前衍生化法，甲醛与2,4-二硝基苯肼反应生成黄色的2，4-二硝基苯腙（见图1），经高效液相色谱分离，紫外检测器在355 nm波长下检测，根据保留时间定性，峰面积定量，以标准曲线法计算含量。本方法对甲醛的检出限为0.01 µg，定量下限为0.052 µg。取0.2 g样品时，本方法对甲醛的检出浓度为0.001%，低定量浓度为0.0052%。

3 试剂

除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为实验室用一级水。

3.1 甲醛标准物质水溶液。

3.2 2,4-二硝基苯肼，纯度 ≥ 99.0%。 3.3 三氯甲烷，色谱纯，含量 ≥ 99.9%。

3.4 盐酸(?20 =1.19 g/mL)。  

3.5 氢氧化钠。 

3.6 磷酸氢二钠（Na2HPO4•12H2O）。 

3.7 磷酸二氢钠（NaH2PO4•2H2O）。

3.8 乙腈，色谱纯。 

3.9 甲醇，色谱纯。

3.10 去离子水。

3.11 2，4-二硝基苯肼盐酸溶液：称取2，4-二硝基苯肼（3.2） 0.20 g，置于锥形瓶中，先加浓盐酸（3.4）40 mL使溶解，必要时可超声助溶，再加去离子水（3.10）60 mL，摇匀，即得。

3.12 氢氧化钠溶液[c（NaOH）= 1 mol/L]：称取NaOH（3.5）10 g，加水适量溶解后，转移到250 mL量瓶中，用去离子水（3.10）稀释并定容至刻度，摇匀，即得。

3.13 磷酸缓冲溶液。精密称定NaH2PO4•2H2O（3.7）2.28 g和Na2HPO4•12H2O（3.6）12.67 g，加水适量溶解后，转移到100 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。

3.14 乙腈水溶液（9+1）：量取乙腈（3.8）180 mL，置锥形瓶中，加水20 mL，摇匀，即得。

3.15甲醛系列标准溶液：精密量取适量甲醛标准物质水溶液（3.1）置于10 mL量瓶中，加乙腈水溶液（3.14）稀释至刻度，摇匀，得质量浓度约为1.04mg/mL 的甲醛储备液，然后按照表1 进行标准溶液的配置。

4 仪器 

4.1 高效液相色谱仪：具有紫外检测器。 

4.2 分析天平：感量0.01mg。 

4.3 超声波清洗仪。 

4.4 离心机。 

4.5 精密吸量管或精密移液器。 

4.6 涡旋振荡器。

5 分析步骤

5.1 样品预处理

称取化妆品样品0.20 g（精确至0.001 g），置具塞刻度管中，加乙腈水溶液（3.14）至2 mL，涡旋2 min，使混匀，以5000 rpm转速离心5 min，精密量取上清液1 mL置5 mL 离心管中，加水2 mL，涡旋30 s，必要时以5000 rpm转速离心5 min，精密量取上清液1 mL置10 mL离心管中，加2，4-二硝基苯肼盐酸溶液（3.11）0.4 mL，涡旋1 min，静置2 min，加磷酸缓冲液（3.13）0.4 mL，再加氢氧化钠溶液（3.12）约1.9 mL调至中性，涡旋10 s，然后加入4 mL 三氯甲烷（3.3），涡旋3 min，以5000 rpm转速离心10 min，取三氯甲烷层溶液1 mL置离心管中，以5000 rpm转速离心10 min，取三氯甲烷层溶液，作为色谱分析待测液，备用。

5.2 色谱柱参考条件

有人说“选择一种合适的样本前处理方法，就等于完成了分析工作的一半”，这恰如其分地道出了样品前处理的重要性。

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