生物药物研发检测

单克隆抗体（mAb）能够有效治疗癌症、自身免疫疾病、病毒感染及其他疾病。抗体治疗药物的新发展旨在增加更多的特异性结合域（双特异性和多特异性），提高其有效性，和（或）将分子缩小为特异性结合域（如 scFv 或 Fab 片段），实现更好的组织渗透性。随着分子变得愈加复杂，潜在的高／低分子量（H/LMW）杂质也变得愈加复杂。因此，为了准确分析各种分子，需要比 UV 更加先进的检测方法来表征 mAb 样品。

多角度光散射法（MALS）适用于测定样品组分的分子量，更好地了解分子的聚集体和片段。MALS检测的是分子被激光束击中时的散射光。散射光的强度取决于分子的浓度和分子量。本文中，我们使用了TSKgel® UP-SW3000-LS 色谱柱和 LenS3 MALS检测器针对 mAb 标准品进行分析。据此，我们展示了增加 MALS检测器可以获取哪些数据、方法的稳健性如何、以及便于集成MALS 检测进入 mAb 分析流程中的设备。

实验条件：

为了展示 MALS 检测与尺寸排阻色谱法联用分析单克隆抗体的优势，我们采用了如下所述的mAb对照品和一种通用的分离方法。因为光散射对盐晶体、微生物或色谱柱脱落物等颗粒比 UV检测更加敏感，为了获得高质量的 MALS 数据，采取了以下匹配措施：流动相两次过滤；使用光散射专用 UHPLC 色谱柱（TSKgel UP-SW3000-LS），该柱曾与其他两种色谱柱进行比较，其噪音水平低；选择 LenS3 MALS 检测器，其具有较高的灵敏度可以表征低丰度的杂质。