生物产业检测

从研究疾病到评估药物和环境化合物诱导的毒性反应，基于细胞的测定法通常聚焦于线粒体，旨在监测细胞健康。线粒体功能是整个细胞健康的关键指标，线粒体功能障碍与多种疾病 ( 包括帕金森氏病，阿尔茨海默氏病，心力衰竭，局部缺血性疾病和癌症 ) 的关联密切相关。 1 此外，罕见疾病的发病机制可能由编码线粒体蛋白的基因或线粒体 DNA 中的突变驱动。 1 在整个药物开发和测试过程中，评估线粒体功能是至关重要的。恢复线粒体功能的疗法的发展和靶向癌症线粒体功能障碍的化疗药物的发展就是例证。 3 此外，线粒体功能的评估是临床前药物安全性评估中至关重要的一步，因为线粒体功能障碍可能由药物触发，进而对细胞和组织健康产生不利影响。测量线粒体膜电位 (MMP) 以监测线粒体代谢活性的变化是一种评估线粒体功能的灵敏且有效的方法。线粒体膜电位是检测凋亡过程中线粒体去极化，检测多药耐药细胞以及评估各种毒性筛选中线粒体功能的重要工具。 1-2 MMP 的评估通常使用亲脂性阳离子荧光染料进行。 根据线粒体膜电位的状态，MITO-ID膜电位染料的荧光会发生变化。具体来说，细胞质中它以单体形成存 在，发出绿 色荧 光 (FITC, 530 nM)；在活性线粒体中，它在线粒体基质中聚集而发出橙色荧光 (TRITC,570 nM)。当 MMP 被破坏时，MITO-ID 染料退出去极化线粒体，而以单体形式存在，可以观测到橙色荧光降低到消失。