使用BioSpec-nano定量蛋白质
2023-02-09489蛋白质溶液中包含表面活性剂、还原剂、变性剂等各种共存物质，这些物质会影响定量分析，需要选择适合样品的分析方法。
紫外吸收法（测定280 nm处的光密度(OD)）是使用分光光度法定量总蛋白浓度的简单的方法。该技术基于蛋白质中的芳香族氨基酸在280 nm时的具有紫外吸收特性,无需预处理,分析操作简单。但是，不同种类的蛋白质即使浓度相同，吸光度也有所差异，此外，当存在核酸等在相同波长范围内有光吸收的物质时，定量会受到影响。相比之下，BCA法(BCA:Bicinchoninic Acid）是一种在不同蛋白质之间显色差异较小的蛋白定量方法。该方法的原理是Cu(I)离子在蛋白质存在的条件下会与二喹啉甲酸配位键合显示紫色，浓度范围大，灵敏度高。
如上所述，蛋白质的定量方法有很多种，但在生物药物的生产中，需要更简单、更加微量的蛋白质定量方法。本文介绍了使用最小可测定1~2uL样品量的生命科学紫外可见分光光度计BioSpec-nano，通过OD280 nm法和BCA法等2种方法定量分析免疫球蛋白(lgG）浓度的案例。
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