食用植物油检测

1.背景

苯并（a）芘（benzo（a）pyrene，BaP），又名3,4-苯并芘，结构式如下图1所示，属于多环芳烃中的一种。苯并（a）芘是强致癌物，被世卫组织定为1类致癌物。

食品中的苯并（a）芘来源比较复杂，主要有熏烤、高温油炸、包装材料污染和食品加工过程污染等。食用油中的苯并（a）芘主要来源有原材料带入和加工过程产生。原材料带入主要包含原材料种植区受到工业污染，在柏油马路上晾晒油料作物，以及长途运输过程环境污染物浸入和包装容器迁移等。加工过程产生主要包含油料高温烘烤等工艺处理过程和浸出工艺中溶剂残留等。

将实施的《GB 2762-2022 食品安全国家标准 食品中污染物限。量》中规定，食用油中苯并（a）芘限。量为10 µg/kg。 本实验参考《GB 5009.27-2016食品安全国家标准 食品中苯并(a)芘的测定》，采用青岛盛瀚的高效液相色谱L-3000系列，对食用油中苯并（a）芘的液相色谱测定法进行方法验证。

2.  仪器和设备

表1 食品中苯并（a）芘的检测所需液相色谱仪器配置

图2 盛瀚L-3000液相色谱仪

表2 食品中苯并（a）芘的检测所需前处理设备

3. 实验方法

3.1试剂和材料

除非另有说明，所用试剂均为优级纯。

乙腈、甲醇、正己烷：色谱纯。

水：超纯水（18.2 MΩ•cm）。

净化柱：中性氧化铝柱22g/60mL

3.2标准溶液

苯并（a）芘标准储备液（100 mg/L）：自购100 mg/L苯并（a）芘乙腈标准溶液。

苯并（a）芘标准中间液（1.0 mg/L）：吸取0.1 mL苯并（a）芘标准储备液（100 mg/L）于10 mL容量瓶，乙腈定容混匀备用。

苯并（a）芘标准工作液：把苯并（a）芘标准中间液（1.0 mg/L）用乙腈稀释得到0.5 ng/mL、1.0 ng/mL、5.0 ng/mL、10 ng/mL、20 ng/mL标准曲线，现用现配。

3.3样品的制备

提取：称取0.4 g（A：0.4032 g，B：0.4014 g），加入5 mL正己烷，涡旋30 s，待过柱。

净化：中性氧化铝柱用30 mL正己烷活化，弃去不要。然后加入提取液，并用茄形瓶收集，再用50 mL正己烷洗脱，继续收集净化液。

浓缩：将净化液40℃旋蒸至1-2 mL，转移至离心管，用正己烷洗涤茄形瓶2次，洗涤液同样转移至离心管，40℃氮吹近干，0.4 mL乙腈涡旋复溶，过0.45 μm滤膜，上机检测。

4. 色谱条件

流动相：水：乙腈=12：88；

流速：1.0 mL/min；

色谱柱：Shinesil-C18 4.6×250，5μm；

柱温：35℃；

检测波长：激发波长384 nm，发射波长406 nm；

进样量：20 μL。

5. 实验结果

5.1典型谱图

图3  1.0 ng/mL苯并（a）芘标准溶液

5.2校准曲线

0.5 ng/mL、1.0 ng/mL、5.0 ng/mL、10 ng/mL、20 ng/mL的苯并（a）芘标准工作液线性方程：Y=216.17653X-5.92576。相关因子：R=0.9999934。

图4 苯并（a）芘标准曲线

5.3重复性测试

苯并（a）芘标准溶液（1 ng/mL）系统适应性测试（SST）结果如下图，保留时间RSD=0.08%，峰面积RSD=0.95%。

图5 苯并（a）芘标准溶液（1 ng/mL）系统适应性测试（SST）结果

5.4实际样品测定

花生油样品苯并（a）芘测试色谱图及上机检测结果如下所示。

表3 食品中苯并芘的检测所需前处理设备

图6 实际样品苯并（a）芘测试谱图

平行样品的绝对差值为0.022 μg/kg，与平行样品算数平均值的比值为2.74%，小于20%，符合《GB 5009.27-2016食品安全国家标准 食品中苯并（a）芘的测定》的要求。

6. 结论

上述实验结果表明，采用盛瀚L-3000高效液相色谱仪，苯并（a）芘标准溶液浓度范围在0.5 ng/mL~20.0 ng/mL内，具有很好的线性，线性相关系数为0.9999934，定性定量重复性良好，可满足《GB 5009.27-2016食品安全国家标准 食品中苯并（a）芘的测定》要求。