原料药检测

本文介绍了利用 Agilent 1290 Infinity Ⅱ 超高效液相色谱 (UHPLC) 系统和 Agilent 6125C  单四极杆质谱检测器对 ADC 药物中游离的小分子毒素 MMAE 和 vc-MMAE 进行定量的两 种分析方法。方法一无需进行复杂的样品前处理，其采用 Agilent PLRP-S 色谱柱 (2.1 × 50 mm, 5 μm, 1000 Å) 并以含 0.1% 甲酸的乙腈和含 0.1% 甲酸的水溶液作为流动相，用 梯度洗脱方法在 20 分钟内分离游离小分子 MMAE、vc-MMAE 和蛋白等基质，然后通过 阀切换将目标分析物切入质谱进行检测，并将基质切入废液，操作方便，具有良好的线 性、精密度和准确度。方法二在样品经过有机溶剂沉淀去除蛋白基质后，用 Poroshell  120 SB-C8 色谱柱 (3.0 × 50 mm, 2.7 μm) 分离 MMAE 和 vc-MMAE，其同样具有良好的线 性、精密度和准确度，且与方法一相比，具有更高的灵敏度。这两种分析方法为生物制 药企业监测抗体偶联药物中的游离小分子 MMAE 和 vc-MMAE 提供了可选的解决方案。