中药材和饮片检测

精确称取粉碎后的样品1 g，加入人工肠液10 mL，置于37℃水浴中超声处理适当时间，摇匀取适量静置约24 h，吸取1 mL中层溶液，用0.45 μm微孔滤膜滤过，精密量取滤液1 mL，用0.125 mol/L盐酸溶液稀释至10 mL，摇匀后即得。同法制备加标液及空白溶液。

LC条件：色谱柱，ZORBAX EclipsePlus C18（4.6 x 150 mm，5 μm）；流 动 相 A，0.01 mol/L乙酸铵 + 0.12% L-半胱氨酸，氨水调节pH=7.5；流动相B，甲醇；流动相梯度，流动相A，0-5.0 min 92%，6.0-9.0 min 55%，11 min 92%；流速1.0 mL/min；进样体积50 μL；柱温30℃。

ICP-MS条件：RF功率 1550 W，冷却气14 L/min，辅助气1.1 L/min，雾化气1.25 L/min，泵速 15 rpm，雾化室温度2℃，采样深度3.53 mm，驻留时间40 ms，扫描次数10次，碰撞气4 mL/min，Hg质量数202。

考察混合标准溶液中二价汞、甲基汞和乙基汞等各形态汞的分离度，可有效提高分析效率并保证分析结果的准确性。二价汞、甲基汞和乙基汞的色谱分离如图1所示。

按照实验条件将50 μg/L的二价汞、甲基汞、乙基汞混合标准溶液重复进样测定6次，记录响应值。实验结果显示，二价汞、甲基汞、乙基汞的响应值的相对标准偏差（RSD）均小于5.0%，表明方法精密度良好。

采用本法测定安宫牛黄丸、人参再造丸、牛黄清心丸、牛黄千金散、天王补心丹、柏子养 心丸、益元散等含朱砂的中成药中的各形态汞的含量，发现除二价汞外，仅在牛黄千金散中检出含量为0.0063 mg/kg的甲基汞，其它药物样品均未检出。对牛黄千金散样品进行加标回收试验，结果见表2。

雄黄为硫化物类矿物，其主要成分为As2S2或As4S4，另含有少量的可溶性砷盐，以As2O3为主。其常用于痈肿疔疮，蛇虫咬伤，虫积腹痛等疾病的治疗。近年来，雄黄在治疗血液系统肿瘤及白血病等血液类疾病方面有显著成效。雄黄中的砷形态主要为无机砷（As3+和 As5+），其毒性高于有机砷。雄黄中 As2O3既是药效部分，也是毒性部分。因此，雄黄及含雄黄成方制剂的毒性和安全性备受关注。

准确称取雄黄样品粉末30 mg（精确到0.1 mg），置于250-mL容量瓶中，加入人工肠液约200 mL摇匀，置37℃水浴中超声处理（功率300 W，频率45 kHz）2 h（每隔15 min充分摇匀依次），冷却后用人工肠液稀释至刻度，摇匀，取适量置50-mL塑料离心管中，静置20~24 h。用洗耳球轻轻吹去上层表面溶液，吸取中层溶液约15 mL（吸取时应避免带入颗粒），用0.45 μm微孔滤膜过滤，精密移取滤液5 mL，置50-mL容量瓶中后，用0.02 mol/L乙二胺四乙酸二钠稀释至刻度，摇匀，待测。同法制备加标液及空白溶液。

LC条件：色谱柱，PRP-X100 阴离子交换色谱柱（250 mm × 4.1mm，10 μm）；流动相A，0.025 mol/L磷酸二氢铵溶液（氨水调节pH8）；流动相B，水；流动相梯度，流动相A，0-15.0 min，0.0-100%；20min，0.0%；流速1.0 mL/min；进样体积100 μL；柱温30℃。

ICP-MS条件：RF功率 1600 W，冷却气 14 L/min，辅助气 1.0 L/min，雾化气 1.28 L/min，泵速 15 rpm，雾化室温度2℃，驻留时间 10 ms。

考察混合标准溶液中As3+和 As5+等不同价态的无机砷的分离度，可有效提高分析效率并保证分析结果的准确性。As3+和 As5+的色谱分离如图2所示。

配置系列浓度的As3+和As5+的标准溶液，以As3+和As5+响应值与其对应浓度为坐标，绘制标准曲线，所得As3+和As5+标准曲线线性相关系数r分别为0.9995和0.9997。按3倍噪音（S/N=3）作为响应值计算对应的浓度，即得到As3+和As5+的检出限（LOD）分别为0.02 μg/L和 10.5 μg/L。

按照实验条件，将雄黄样品提取液连续6次重复进样测定，记录As3+和As5+的响应值。实验结果显示，As3+和As5+响应值的相对标准偏差（RSD）分别为3.7%和2.5%，表明方法精密度良好。

采用本法测定雄黄样品中不同价态无机砷的含量，样品分离色谱图如图3所示，三次测定结果见表3。在雄黄样品溶液中加入一定量的As3+和 As5+标准溶液，混合均匀后放置过夜，通过超声提取，测定样品加标回收率，结果见表 3 。

本文参考中国药典通则《2322汞和砷形态分析及其价态测定法》，以及药典中关于雄黄样品的前处理，采用 LC-ICP-MS 测定雄黄样品中无机砷形态的含量。雄黄样品中As3+、As5+的加标回收率分别为108%和104%，响应测定值的RSD分别为 3.7%和 2.5%，标准曲线线性系数R均大于0.9995，方法检出限分别为0.02 μg/L和10.5 μg/L，表明本方法适用于雄黄中不同价态无机砷的测定。