答疑解惑丨细菌内毒素检测常见问题解答第三弹:试剂选择与保存指南!
时间:2024-12-02 阅读:147
在前两期中,我们分别探讨了细菌内毒素检测中的常见问题以及检测仪器的选择与操作细节,为细菌内毒素检测工作提供了全面的指导。然而,细菌内毒素检测领域的复杂性远不止于此,试剂的选择、保存条件及其与检测方法的匹配同样对检测结果的准确性产生深远影响。
本期,我们将聚焦于细菌内毒素试剂的相关问题,旨在帮助相关从业者更加深入地理解试剂在细菌内毒素检测中的关键作用,进一步提升检测工作的精确性和效率。
一、细菌内毒素特异性试剂的定义
细菌内毒素特异性试剂是指一类专门设计用于仅与细菌内毒素发生反应的检测试剂。与之相对,常规的鲎试剂除了能够检测细菌内毒素外,还可能与真菌细胞壁成分如(1→3)-β-D-葡聚糖发生交叉反应。
因此,细菌内毒素特异性试剂在检测过程中提供了更高的准确性和特异性,避免了因非细菌内毒素成分引起的假阳性结果。
二、单次检测与多次检测的区别
(一)单次检测:在这种检测方式中,单次分量的鲎试剂已预先被添加到反应试管中。检测时,只需将一定体积的测试溶液加入试管,即可进行内毒素的检测。这种方式简化了操作步骤,适用于快速、高效的检测需求。
(二)多次检测:在多次检测中,鲎试剂首先需要用细菌内毒素检测用水进行溶解。然后,将溶解后的鲎试剂按一定等分量分配到反应试管或微孔板中,供后续多次检测使用。这种方式虽然操作相对复杂,但能够灵活应对大量样本的检测需求,且降低了试剂的浪费。
三、试剂的保存条件与期限
为了确保试剂的有效性和准确性,所有试剂都应冷藏保存。具体保存条件和期限如下:
▶▶Pyrotell® MTV(凝胶法鲎试剂):应保存在-20℃至8℃之间,直至产品有效期结束。
▶▶Pyrotell® STV(凝胶法鲎试剂):同样应保存在-20℃至8℃之间,直至产品有效期结束。
▶▶Pyrosate®(凝胶法内毒素快速检测试剂):可在2℃至25℃之间保存,直至产品有效期。
▶▶Pyrotell®-T(浊度法鲎试剂):应保存在-20℃至8℃之间,并在复溶后于2-8℃下保存24小时,或-20℃下冻存3个月(只能冻融一次)。
▶▶Pyrochrome®(显色法鲎试剂):应保存在-20℃至8℃之间,并在复溶后于2-8℃下保存8小时(不能冻存)。
▶▶PyroSmart NextGen® (重组鲎试剂):鲎试剂和复溶缓冲液应储存于2-8℃环境中。使用前需恢复室温至少30分钟,并在复溶后室温放置,于3-20分钟内使用。
▶▶细菌内毒素工作标准品(CSE):0.5μg/vial的CSE(E0005)应在2-8℃下保存,并在复溶后不超过4周内使用(不能冻存)。系列稀释前需至少涡旋30秒。125μg/vial的CSE(E0125)同样应在2-8℃下保存,并在复溶后不超过3个月内使用(不能冻存)。系列稀释前也需至少涡旋30秒。