叶绿色的测定方法步骤
时间:2021-04-21 阅读:2392
测定叶绿素的主要步骤如下:
(1)过滤:
抽滤前加入碳酸镁悬浊液防止色素分解。负压不能超过50kPa。
(2)叶绿素的提取:
先研磨,将滤膜放置于组织研磨器中,加入4-5ml 的90%丙酮溶液,500r/min 研磨3min。破碎滤膜上浮游植物藻类细胞。
然后浸泡提取:将破碎后的细胞提取液转移至15ml 离心管中,用90%丙酮溶液冲洗研磨器及研磨杵一并转入离心管,定容至10ml。混匀后4℃暗处浸泡提取。浸泡时间为15min 至24h。过程中要颠倒混匀数次。
最后离心澄清:1000g 离心20min 或过滤,将上清液转移至旋塞玻璃小瓶中。
(3)测定方法:
分光光度法,三色方程测定664nm、647nm、630nm、750nm 吸光度计算叶绿素a、b、c 叶绿素含量。单色方程测定脱镁叶绿素a 校正后的含量。