核酸分离试剂盒

核酸分离试剂盒

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具体成交价以合同协议为准
2011-08-22 16:50:34
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宜康达科技(广州)有限公司

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产品简介

本品根据硅胶膜特异性吸附原理以实现核酸分离。本产品主要原理如下:

1. 使用裂解液、助沉剂和无水乙醇实现核酸和蛋白质的分离和浓缩;

2. 使用核酸吸附柱将核酸吸附于硅胶膜;

详细介绍

通用名称:核酸分离试剂盒(硅胶膜吸附法)
英文名称:Nucleic Acid Isolation Kit
 

产品特点:

本品根据硅胶膜特异性吸附原理以实现核酸分离。本产品主要原理如下:

1. 使用裂解液、助沉剂和无水乙醇实现核酸和蛋白质的分离和浓缩;

2. 使用核酸吸附柱将核酸吸附于硅胶膜;

3. 使用洗涤液去除残留在膜上的蛋白杂质和有机物;

4. 使用洗脱液将纯化的核酸( DNA/RNA )从膜上洗脱。

试验方法:

1. 样本预处理
血清及血浆样本按常规方法制备,新鲜样本应尽快处理或分装后于-70℃冻存,避免反复冻融。
2. 准备及注意事项:
2.1 分别在洗液A瓶和洗液B瓶中加入16ml和60ml无水乙醇,颠倒充分混匀,并在瓶身上加以标识。
2.2 吸取所需的洗脱液,加至一无核酸酶的eppendorf管中,于70℃预热。
2.3 冷冻样本应室温融化,轻微震荡混匀后使用。
2.4 区分操作中的离心设置(rpm和g),本产品操作过程均为室温离心。
2.5 助沉剂在低温保存时可能呈胶状,吹打混匀即可使用。
3. 样本裂解及核酸吸附
3.1 在1.5ml无核酸酶的离心管中加入5μl助沉剂和200μl 裂解液,加入100μl待处理样本,剧烈震荡2分钟,室温静置10分钟。
注:如样本体积小于或大于100ul,需按比例改变助沉剂、裂解液以及无水乙醇体积。体积大于400ul样本应分多次进行处理。
3.2 加入240μl无水乙醇,颠倒混匀,将裂解混合物全部转移到核酸吸附柱中。
注:如样本体积小于或大于100ul,需按比例改变乙醇用量。裂解混合物分两次全部转移至核酸吸附柱中。
3.3 3500g离心2分钟,取下套管,倒掉套管中的液体。
3.4 将核酸吸附柱重新装入套管,6000g离心1分钟,倒掉套管中的液体。
4. 核酸纯化
4.1 将核酸吸附柱重新装入套管,在核酸吸附柱中加入500μl 洗液A,6000g离心1分钟,将核酸吸附柱装入一个干净套管中。
4.2 在核酸吸附柱中加入500μl 洗液B,静置1分钟,6000g离心1分钟。
4.3 倒掉套管中的液体,将核酸吸附柱重新装入套管。
4.4 重复4.2步骤。
4.5 将核酸吸附柱换一新套管,13000rpm离心3分钟。
5. 核酸洗脱
5.1 将核酸吸附柱装入一无核酸酶1.5ml离心管,小心在吸附膜中央加入50μl预热洗脱液,室温静置4分钟。
5.2 10000rpm离心2分钟,离心管中液体即待检纯化RNA。
6. 使用真空泵进行核酸分离
本试剂盒可使用真空泵进行操作,真空泵主要用于替换步骤3 -5 中的离心过程。具体方法为:将柱子插到真空架的接口,开启离心泵抽真空,柱子内的液体全部抽干时关掉电源。
其中后一步离心洗脱时仍使用5.2 中离心步骤制备。
 

结果的解释、产品性能指标:

使用经梯度稀释的人工假病毒作为质控品(L1~L4),用进口同类试剂(如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini Kit)对质控品进行核酸分离,并用荧光PCR方法检测核酸含量。使用本品进行核酸分离低应达到同等检测结果(质控品阳性率2/4)。

规格、有效期:

【包装规格】48次/包装。
【储存条件及有效期】核酸分离试剂于2-8℃保存,有效期12个月。
 
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