关于尺寸排阻的保存及清洗你需要知道的
时间:2021-04-26 阅读:2106
尺寸排阻色谱柱的保存:日常使用中,SepaxSEC色谱柱建议保存在150mM磷酸盐缓冲液中(pH7.0)。如长期不用时,可将色谱柱保存至20%乙醇中,以防止菌体污染。(注:可根据具体使用条件选择保存方式,如实验条件为缓冲盐体系,建议保存在150mM磷酸盐缓冲液中,pH7.0。若实验条件为有机溶剂体系,建议保存在20%乙醇中。)
尺寸排阻色谱柱的清洗:多次使用后某些样品可能会吸附到入口筛板或填料上,当积累至一定程度时会出现压力升高并伴随峰型展宽的现象,此时需要清洗色谱柱。一般流程为:断开检测器,反接色谱柱,在低于50%大推荐流速下用清洗液冲洗10-15倍柱体积。一般有:
0.5M硫酸钠溶液(pH3.0):适用于碱性蛋白的清洗;
10%-20%有机溶剂(乙醇、异丙醇、乙腈):疏水性蛋白的清洗;
4M尿素(pH7.0):适用于易聚集蛋白样品的清洗。