小鼠前列腺素 E2（PGE2）酶联免疫分析（ELISA）
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
药品名称：
通用名：小鼠前列腺素 E2（PGE2）酶联免疫分析试剂盒
使用目的：
本试剂盒用于测定小鼠血清，血浆及相关液体样本中前列腺素 E2（PGE2）含量。
实验原理
本试剂盒应用酶联免疫竞争法测定标本中小鼠前列腺素 E2（PGE2）水平。用纯化的小鼠
前列腺素 E2（PGE2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中加入前列腺素
E2（PGE2），和HRP 标记的羊抗鼠抗原，使它们竞争结合，，经过*洗涤后加底物TMB 显
色。样本颜色的深浅和样品中的前列腺素 E2（PGE2）的含量呈负相关。用酶标仪在450nm 波
长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中小鼠前列腺素 E2（PGE2）的含量。
试剂盒组成
1 20 倍浓缩洗涤液30ml×1 瓶7 终止液6ml×1 瓶
2 酶标试剂6ml×1 瓶8 标准品（450ng/L） 0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板12 孔×8 条9 标准品稀释液1.5ml×1 瓶
4 样品稀释液6ml×1 瓶10 说明书1 份
5 显色剂A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 张
6 显色剂B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 个
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10 孔，在*、第二孔中分别加标
准品100μl，然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从*孔、第二
孔中各取100μl 分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，
混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl 弃掉，再各取50μl 分别加到第五、第六孔
中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各
取50μl 分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混
匀后从第七、第八孔中分别取50μl 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准
品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl 弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，
浓度分别为300ng/L，200ng/L ，100ng/L，50ng/L， 25ng/L）。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样
品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样
品zui终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，轻轻晃动混匀。
3. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
4. 温育：用封板膜封板后置37℃温育60 分钟。