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酶标板振荡器在Rh阴性稀有血型库建立中的应用

时间:2010-12-15      阅读:5216

1  材料与方法

    1.1  标本  经EDTA-K2抗凝的无偿献血者全血标本。

    1.2  试剂  抗-D血型

    1.3  器材  平底微孔反应板(国产);平板离心机;MSK酶标板振荡器;酶标仪;进口微量移液器。

    1.4  方法  微板法:将抗-D血清25μl和稀释成一定比例的待检红细胞10μl加到平底微孔反应板中,用振荡仪在一定条件下振荡均匀,再经平板离心机以1000r/min,离心1min,再用振荡仪在一定条件下振荡悬浮。凝集的红细胞块散于孔底,不凝集的红细胞呈混悬状态。用酶标仪630nm波长自动扫描,获取每孔的相对透光率(Tc)。试管法和平板法同常规血型鉴定方法。

    2  结果

    2.1  振荡条件的选择  在混匀及悬浮过程中各选8个标本(阴、阳性标本各4孔),在微孔中用上述方法加入抗-D血清和红细胞,,振荡时间分别为5、10、15、20、25、30s,振幅大小与震荡时间成反比,zui终选择混匀条件500转15s,悬浮条件600转/每分钟振幅20s。

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