酶标板振荡器在Rh阴性稀有血型库建立中的应用
时间:2010-12-15 阅读:5216
1 材料与方法
1.1 标本 经EDTA-K2抗凝的无偿献血者全血标本。
1.2 试剂 抗-D血型
1.3 器材 平底微孔反应板(国产);平板离心机;MSK酶标板振荡器;酶标仪;进口微量移液器。
1.4 方法 微板法:将抗-D血清25μl和稀释成一定比例的待检红细胞10μl加到平底微孔反应板中,用振荡仪在一定条件下振荡均匀,再经平板离心机以1000r/min,离心1min,再用振荡仪在一定条件下振荡悬浮。凝集的红细胞块散于孔底,不凝集的红细胞呈混悬状态。用酶标仪630nm波长自动扫描,获取每孔的相对透光率(Tc)。试管法和平板法同常规血型鉴定方法。
2 结果
2.1 振荡条件的选择 在混匀及悬浮过程中各选8个标本(阴、阳性标本各4孔),在微孔中用上述方法加入抗-D血清和红细胞,,振荡时间分别为5、10、15、20、25、30s,振幅大小与震荡时间成反比,zui终选择混匀条件500转15s,悬浮条件600转/每分钟振幅20s。