溶液的配制

1、稀释抗体溶液：将抗体浓缩液摇匀，用缓冲液10倍稀释抗体浓缩液，现用现配。

2、稀释酶结合物：将酶结合物浓缩液摇匀，用缓冲液10倍稀释酶结合物浓缩液，现用现配。

3、底物溶液的配制：用底物缓冲液10倍稀释底物浓缩液，根据需要的量现用现配，底物溶液变蓝禁止使用。

七、样品的前处理方法：

    牛奶：新鲜牛奶或解冻牛奶50µL，加水950µL，1：20稀释，作样品液备用。

八、检测步骤：

1、剪开锡箔袋，按每个标准液和样品提取液2孔计算所需微孔板条的数量，插入框架。

2、各取系列标准液和样品液20µL分别加到其对应微孔中，每个标准和样品加双孔。

3、每孔加稀释好的酶结合物20µL。

4、每孔加稀释好的抗体100µL，在MicBio-IV微孔板恒温振荡器上*混匀，用封口膜封好，室温孵育30分钟。

5、倒出孔内液体，在吸水纸上拍打，使孔中没有残留的液体。使用多道移液器，每孔加水250µL，再倾倒干净。如此洗板，重复三次。

6、每孔加底物溶液100µL，室温避光孵育30分钟。

7 、每孔加终止液100µL，混匀。

8 、在450nm波长处测吸光度值。60分钟内读数。