RACE技术-漩涡振荡器技术文章
时间:2013-12-10 阅读:4048
race技术-漩涡振荡器技术文章
RACE(rapid-amplification ofcDNA ends)是通过PCR进行cDNA末端快速克隆的技术,
通过PCR技术实现的,无须建立cDNA文库,可以在很短的时间内获得有利用价值的
信息.一般分5-和3-RACE两种.3-RACE较简单,首先将mRNA或总RNA 用PolyT引物反转
录,根据一般基因具有polyA尾巴的特点,选用特异引物(根据已知序列设计)和PolyT引物
PCR即可.大多实验者反映一次PCR可以搞定.5-RACE相对较难,目前流行几种5-RACE.
其一为加接头(传统),根据接头引物和自己设计特异引物PCR,可以设计巢式PCR二次扩
增.另外,有利用反向PCR技术,连接成环在PCR.还有,GENE公司一种smart RACE PCR,利
用反转酶末断加C特点,直接加上多G接头,转换模板而无需用连接酶加接头.